[发明专利]非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂及其制备方法与用途

权利要求书

1.一种非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂，其特征在于，包括用于分别检测非洲猪瘟病毒CP530R基因、猪瘟病毒5’-UTR基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的三对特异性引物、三条特异性探针和三个阳性对照，扩增目标长度分别为73bp、77bp和95bp，引物和探针序列为：

非洲猪瘟病毒

上游引物：CP530R-F:5’-GTGTCAATAATCCCTATCTTGCCA-3’          SEQ ID NO.1

下游引物：CP530R-R：5’-AACTCGGTGGGATGGTTGAG-3’             SEQ ID NO.2

探针：CP530R-P:5’-FAM-TCCTTGCTGTCTTTCTTGTC-3’-MGB          SEQ ID NO.3

阳性对照：ACTGGTGTAGTGTCAATAATCCCTATCTTGCCAAATCAGTTTCCTTGCTGTCTTTCTTGTCGCTCAACCATCCCACCGAGTTTATTAAGGTACTGCCGCTTATAGAC；              SEQ ID NO.4

猪瘟病毒

上游引物：CSFV-5’UTR-F:5’-GTTCGACGTGAGCAGAAGCC-3’         SEQ ID NO.9

下游引物：CSFV-5’UTR-R:5’-CCGCTAGGGTTAAGGTGTGTC-3’        SEQ ID NO.10

探针：CSFV-5’UTR-P:5’-VIC-ACCACCATAGCAATGAGCAAGG-MGB-3’       SEQ ID NO.11

阳性对照：CTGGGTGGTCTAAGTCCTGAGTACAGGACAGTCGTCAGTAGTTCGACGTGAGCAGAAGCCCACCTCGAGATGCTATGTGGACGAGGGCATGCCCAAGACACACCTTAACCCTAGCGG

                                                             SEQ ID NO.12

猪繁殖与呼吸综合征病毒

上游引物：PRRSV-NSP2-F:5’-CTCACAGACGGAATATGAGGC-3’         SEQ ID NO.17

下游引物：PRRSV-NSP2-R:5’-CACTCAGGACTTCCTCAGCTTC-3’            SEQ ID NO.18

探针：PRRSV-NSP2-P:5’-NED-CACCATCGCAGAAC-MGB-3’                SEQ ID NO.19

阳性对照：GATGAGCCTCTGGATTTGTCTGCGTCCTCACAGACGGAATATGAGGCTTTCCCCCTAGCACCATCGCAGAACATGGGCATCCTGGAGGCGGGGGGGCAAGAAGCTGAGGAAGTCCTGAGTGAAATCTC

                                                             SEQ ID NO.20。