[发明专利]与大豆油脂含量显著关联的GmDGK7基因分子标记及其应用有效
申请号: | 201510192438.9 | 申请日: | 2015-04-21 |
公开(公告)号: | CN104762403B | 公开(公告)日: | 2017-07-11 |
发明(设计)人: | 李艳;陆亮;盖钧镒 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 高玲玲 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大豆 油脂 含量 显著 关联 gmdgk7 基因 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与大豆油脂含量显著关联的GmDGK7基因分子标记在大豆油脂含量分子标记辅助选择中的应用,所述分子标记的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1所示,在第154位有1个G154-A154碱基突变,导致SNP-dCAPs多态性。
2.根据权利要求1所述的与大豆油脂含量显著关联的GmDGK7基因分子标记在大豆油脂含量分子标记辅助选择中的应用,其特征在于,所述分子标记的碱基突变位点位于大豆GmDGK7基因的5'-UTR区。
3.一种用于扩增与大豆油脂含量显著关联的GmDGK7基因分子标记的引物对在大豆油脂含量分子标记辅助选择中的应用,所述引物对的引物1如序列表Seq ID No.2所示,引物2如序列表Seq ID No.3所示;
Seq ID No.2:5'-ACTATTTCGTCTTTGCCTGC-3';
Seq ID No.3:5'-TTGCTTCTTCAACTCCTCCT-3'。
4.一种大豆油脂含量分子标记辅助选择的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)根据权利要求1中的GmDGK7基因分子标记设计引物,以被检测大豆基因组DNA为模板进行PCR扩增,扩增程序为95℃预变性5min,94℃40s,53.5℃30s,72℃1.5min,30个循环,72℃延伸10min;
(2)PCR产物进行胶回收,回收后分别用限制性内切酶BsgI酶于37℃酶切2h;
(3)酶切产物用2.0%琼脂糖凝胶进行电泳分离后用Bio-Rad凝胶成像系统进行检测和记录;
(4)对应扩增产物不可以切开,则SNP位点碱基为A,对应扩增产物可以切开,则SNP位点碱基为G;碱基为A的大豆品种籽粒油脂含量低,碱基为G的大豆品种油脂含量高。
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