[发明专利]春化基因Vrn-D1c、其鉴定引物及Vrn-D1c基因型小麦的鉴定方法

权利要求书

1.一种导致小麦提前开花和抽穗的春化基因Vrn-D1c，包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

2.一种权利要求1所述春化基因Vrn-D1c的检测引物，包括以下引物对：

上游引物：5’- CGACCCGGGCGGCACGAGTG-3’；

下游引物：5’- AGGATGGCCAGGCCAAAACG-3’。

3.一种Vrn-D1c基因型小麦的鉴定方法，包括以下步骤：

1）以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2所述检测引物进行PCR扩增；

2）检测所得扩增产物，出现786bp条带的待测小麦为Vrn-D1c基因型小麦；检测所得扩增产物，不出现786bp条带的待测小麦为非Vrn-D1c基因型小麦。

4.根据权利要求3所述的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增中的反应体系由以下含量的原料组成：1.5mmol/L MgCl₂，0.3mmol/L dNTP，上、下游引物各10pmol，模板DNA 200ng，0.5U Taq酶，加1×PCR缓冲液定容至25μL。

5.根据权利要求3所述的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增中反应程序为：先95℃预变性5min，然后95℃变性60s、58℃退火60s、72℃延伸1min，如此进行35个循环；最后，72℃延伸10 min。

6.根据权利要求3所述的鉴定方法，其特征在于，所述扩增引物的检测方法为：取所得扩增产物10μL进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结束后用凝胶成像系统扫描成像并用计算机进行分析。

7.一种Vrn-D1基因型小麦的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）以待测小麦的基因组DNA为模板，用权利要求2所述检测引物进行PCR扩增；

2）检测所得扩增产物， 出现612bp条带的待测小麦为vrn-D1基因型小麦。