[发明专利]鸡传染性法氏囊病病毒抗原的制备方法及其制品有效
| 申请号： | 201510199796.2 | 申请日： | 2015-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN104761624B | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 胡小元;李轶女;张志芳;李田田;杨鑫;易咏竹;吕言娜;王智权 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C07K14/08 | 分类号： | C07K14/08;C12N15/40;C12N15/866;C12N5/10;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 传染性 法氏囊病 病毒 抗原 制备 方法 及其 制品 | ||
1.优化后的鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus)VP2/4/3多聚蛋白基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示。
2.含有权利要求1所述优化后的鸡传染性法氏囊病病毒VP2/4/3多聚蛋白基因的表达载体。
3.一种鸡传染性法氏囊病病毒抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)分别将鸡传染性法氏囊病病毒原始VP2/4/3多聚蛋白基因、原始VP2基因、权利要求1所述优化后的鸡传染性法氏囊病病毒VP2/4/3多聚蛋白基因克隆到杆状病毒转移载体中，构建得到重组转移载体；
(2)将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，获得重组杆状病毒；
(3)将重组杆状病毒感染昆虫细胞或昆虫宿主，培养被感染的昆虫细胞或昆虫宿主表达相应的抗原，纯化，即得。
4.一种鸡传染性法氏囊病核酸疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)分别将鸡传染性法氏囊病病毒原始VP2/4/3多聚蛋白基因、原始VP2基因、权利要求1所述优化后的鸡传染性法氏囊病病毒VP2/4/3多聚蛋白基因克隆到哺乳动物启动子控制的杆状病毒转移载体中，构建得到重组转移载体；
(2)将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，获得重组杆状病毒；
(3)将重组杆状病毒感染昆虫宿主或细胞，在昆虫宿主或细胞中呈递外源基因，制备得到核酸疫苗。
5.按照权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述哺乳动物启动子选自CAG启动子、PEC启动子、CMV启动子、人巨细胞病毒早期启动子、人延伸因子1-亚基启动子、Rous肉瘤长末端重复序列、人leukosialin基因启动子、鼠3-磷酸甘油激酶l基因启动子、人泛素蛋白C基因启动子、鸡β-肌动蛋白启动子和CMV增强子序列构成的杂合启动子或鼠乳房瘤病毒启动子。
6.按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述哺乳动物启动子是CAG启动子。
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