[发明专利]一种适用于提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法有效

专利信息
申请号: 201510202596.8 申请日: 2015-04-23
公开(公告)号: CN104894104B 公开(公告)日: 2018-04-17
发明(设计)人: 盛鸥;邓贵明;魏岳荣;邝瑞彬;李春雨;易干军 申请(专利权)人: 广东省农业科学院果树研究所
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司44001 代理人: 刘明星
地址: 510640 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 适用于 提取 香蕉 不同 组织 基因组 dna 方法
【权利要求书】:

1.一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤一:取香蕉组织样品,加入液氮研磨成粉末,迅速转至离心管中;

步骤二:在所述步骤一的所述香蕉组织样品中加入提取缓冲液、10%SDS与氯化苄,充分混匀后水浴;

步骤三:在经所述步骤二得到的混合液中加入乙酸钠冰浴,然后离心;

步骤四:取经所述步骤三所得的上清至一干净离心管,加入预冷的异丙醇,混匀后离心,弃上清液;

步骤五:取经所述步骤四得到的沉淀用75%的乙醇洗涤,室温挥发乙醇,然后加入TE buffer或无菌水,再用适量的RNase A消化,取出后于-20℃保存备用;

所述步骤一中所述香蕉组织样品的量为0.5g;所述步骤二中所述提取缓冲液为1ml、所述10%SDS为150μl、所述氯化苄为600μl;所述步骤三中加入所述乙酸钠为450μl。

2.如权利要求1所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述提取缓冲液包括pH 9.0的100mmol·L-1Tris-HCl、pH 8.0的40mmol·L-1EDTA。

3.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤二中水浴温度为65℃,水浴时间为45min。

4.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤三中所述乙酸钠冰浴所述混合液的时间为15min,并且13000×g离心8min。

5.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤四中,13500×g离心10min。

6.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤五中,所述75%的乙醇洗涤所述沉淀的次数为两次。

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