[发明专利]一种适用于提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法有效
申请号: | 201510202596.8 | 申请日: | 2015-04-23 |
公开(公告)号: | CN104894104B | 公开(公告)日: | 2018-04-17 |
发明(设计)人: | 盛鸥;邓贵明;魏岳荣;邝瑞彬;李春雨;易干军 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院果树研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510640 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 提取 香蕉 不同 组织 基因组 dna 方法 | ||
1.一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一:取香蕉组织样品,加入液氮研磨成粉末,迅速转至离心管中;
步骤二:在所述步骤一的所述香蕉组织样品中加入提取缓冲液、10%SDS与氯化苄,充分混匀后水浴;
步骤三:在经所述步骤二得到的混合液中加入乙酸钠冰浴,然后离心;
步骤四:取经所述步骤三所得的上清至一干净离心管,加入预冷的异丙醇,混匀后离心,弃上清液;
步骤五:取经所述步骤四得到的沉淀用75%的乙醇洗涤,室温挥发乙醇,然后加入TE buffer或无菌水,再用适量的RNase A消化,取出后于-20℃保存备用;
所述步骤一中所述香蕉组织样品的量为0.5g;所述步骤二中所述提取缓冲液为1ml、所述10%SDS为150μl、所述氯化苄为600μl;所述步骤三中加入所述乙酸钠为450μl。
2.如权利要求1所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述提取缓冲液包括pH 9.0的100mmol·L-1Tris-HCl、pH 8.0的40mmol·L-1EDTA。
3.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤二中水浴温度为65℃,水浴时间为45min。
4.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤三中所述乙酸钠冰浴所述混合液的时间为15min,并且13000×g离心8min。
5.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤四中,13500×g离心10min。
6.如权利要求1、2任一项所述的一种适用于快速提取香蕉不同组织的基因组DNA的方法,其特征在于,所述步骤五中,所述75%的乙醇洗涤所述沉淀的次数为两次。
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