[发明专利]用于基因组测序核酸扩增的聚苯乙烯微球的制备方法有效
申请号: | 201510204426.3 | 申请日: | 2015-04-28 |
公开(公告)号: | CN104844742A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 蔡亦梅;高静;徐潇;吴超;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风 | 申请(专利权)人: | 北京中科紫鑫科技有限责任公司 |
主分类号: | C08F112/08 | 分类号: | C08F112/08;C08F2/12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 基因组 核酸 扩增 聚苯乙烯 制备 方法 | ||
1.一种聚苯乙烯微球的制备方法,其制备的微球可用于基因组测序文库制备中的核酸扩增,所述微球粒径为25微米,具体步骤如下:
(1) 将分散剂加入反应介质中,通入氮气;搅拌至均相体系;
(2) 将苯乙烯单体和引发剂加入反应体系中;将反应体系升温;然后在搅拌条件下进行恒温反应;冷却至室温、洗涤、干燥。
2.所述反应介质选自水、乙醇、乙二醇单甲醚和甲醇的一种或者两种以上的任意组合。
3.所述的分散剂为磷酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚丙烯酸、聚乙烯醇和羟丙基纤维素中的一种或者两种以上的任意组合。
4.引发剂选自偶氮二异丁腈(AIBN) 或者过氧化苯甲酰(BPO)的一种或两种的任意比例组合。
5.根据权利要求1所述聚苯乙烯微球的制备方法,其特征在于,所述反应介质为水和乙二醇单甲醚,其中,水和乙二醇单甲醚的重量百分比为10~90%和10~90%;也可以为20~40%和60~80%,优选为23%和77%。
6.根据权利要求1所述聚苯乙烯微球的制备方法,其特征在于,所述分散剂由聚乙烯醇、羟丙基纤维素和聚乙二醇组成,聚乙烯醇、羟丙基纤维素和聚乙二醇的重量百分比为10~80%、10~80%和10~80%;也可以为20~40%、30~50%和20~50%,优选为25%、35%和40%。
7.根据权利要求1所述聚苯乙烯微球的制备方法,其特征在于,引发剂选自偶氮二异丁腈(AIBN) 或者过氧化苯甲酰(BPO)的一种或两种的任意比例组合。
8.在优选的实施方案中,所述引发剂为偶氮二异丁腈。
9.根据权利要求1所述聚苯乙烯微球的制备方法,其特征在于,在最终的反应体系中,苯乙烯单体、分散剂、引发剂和反应介质的重量百分比依次为5~40%的苯乙烯单体,0.1~1%的分散剂,0.025~0.125%的引发剂,反应介质余量;优选为32%的苯乙烯单体,0.3%的分散剂,0.05%的引发剂,反应介质余量。
10.根据权利要求1所述聚苯乙烯微球的制备方法,其特征在于,在最终的反应体系中,所述步骤(2)的将反应体系升温至10-90℃,优选为75℃;搅拌速度控制在80~120转/分钟,优选为100转/分钟。
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