[发明专利]将脐带间充质干细胞诱导分化成少突胶质细胞的方法

说明书

公开了将脐带间充质干细胞诱导分化成少突胶质细胞的方法。该方法采用预诱导和诱导二步结合法，并配制了优化的预诱导培养液和诱导培养液，其中通过加入皂苷类化合物作为诱导物，成功诱导脐带间充质干细胞分化成少突胶质细胞，并且分化比例较高。

技术领域

本发明涉及神经生物学领域，特别涉及一种将脐带间充质干细胞诱导分化成少突胶质细胞的方法，本发明还涉及培养得到的少突胶质细胞。

背景技术

自2000年Erices等报道脐带血中含有丰富的造血干细胞和间充质干细胞以来，因脐带血间充质干细胞的多向分化潜能，免疫调节作用和无伦理问题等优点，备受研究者的关注。随后，有学者分别报道了脐带血间充质干细胞在体外可诱导表达神经元标志物、神经胶质细胞标志物、以及少突胶质细胞。目前人们已经可以成功地体外分离培养脐带血间充质干细胞，并且对其生物学特性、表面标志和免疫原性有了进一步的了解。近年来成功地诱导脐带血间充质干细胞分化为骨、脂肪、软骨、肝脏及神经等成体细胞，展示了脐带血间充质干细胞的无限分化潜能和广阔的应用前景，从而为体外诱导脐带血间充质干细胞分化各种成体细胞和各种疾病的治疗提供了新的思路。

脐带间充质干细胞(MSC)是中胚层起源的，能够进行自我更新，并具备向成骨、软骨和脂肪三种中胚层系细胞分化潜能的一种成体干细胞。近年来研究发现MSC在中胚层之外，还可以跨胚层进行转分化，如分化成外胚层系的神经细胞和上皮细胞以及内胚层系的肝细胞和胰腺细胞。因为MSC来源广泛，易于分离培养，免疫原性较低，且不存在胚胎干细胞所面临的伦理学问题，这使其在再生医学方面的应用具备了其他干细胞所没有的优势。中枢神经系统的神经退行性疾病如帕金森氏综合征以及外部创伤造成的神经损伤等长期困扰人类的问题也因此将有更为现实可行的解决之道。

CN104004713A公开了一种将脐带间充质干细胞诱导培养为神经细胞的方法，采用预诱导和诱导二步结合法，并配制了优化的预诱导培养液和诱导培养液，通过该诱导方式，诱导周期短、细胞分化均一度高，而且电生理检测发现该神经细胞具有诱导放电功能，成功得到诱导的神经细胞。

CN101451123A公开了一种诱导人骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞分化的方法。本发明的目的是提供一种获得大量少突胶质细胞以用于治疗髓鞘损伤或脱髓鞘等疾病。本发明通过简易的平板黏附法获取大量的自体人骨髓间充质干细胞，用黏附分子F3/Contactin诱导人骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞分化。

CN101831401A公开了一种体外诱导间充质干细胞分化为神经干细胞的方法，在添加了bFGF、成纤维细胞生长因子FGF8、SHH和白血病抑制因子LIF的DMEM/DF-12培养体系中预诱导间充质干细胞；在添加了bFGF、FGF8和SHH的无血清neurobasal medium培养体系中将预诱导的细胞定向分化为神经干细胞。

CN102337246A公开了一种刺五加苷处理人间充质干细胞得到少突胶质前体细胞及其增殖的分化培养基，所述分化培养基包括液体基础培养基，其中，以所述液体基础培养基的体积为基准，所述分化培养基还含有1-500ug/mL的刺五加苷、1-20体积％的胎牛血清、5-300ng/mL人表皮生长因子(EGF)和5-300ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)；还提供了使用前述分化培养基的制备该刺五加苷处理试剂盒的方法；还提供了包括前述的方法获得的少突胶质前体细胞的用于治疗神经系统疾病的药物组合物。