[发明专利]一种新型人3号染色体探针的制备方法及其应用有效
申请号: | 201510211541.3 | 申请日: | 2015-04-29 |
公开(公告)号: | CN104830844A | 公开(公告)日: | 2015-08-12 |
发明(设计)人: | 陈华云;刘淑园;陈嘉昌;丁渭;肖湘文;黄爽;曾烨;赵丽;方凤银 | 申请(专利权)人: | 广州和实生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68 |
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地址: | 510665 广东省广州市经济*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 染色体 探针 制备 方法 及其 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种新型人3号染色体探针的制备方法及其应用。
背景技术
荧光原位杂交(FISH, fluorescence in situ hybridization)是一项在体外直接观察细胞中特定核酸的技术。根据碱基互补配对的原则,特定的DNA序列与细胞内的目标序列互补结合。由于探针带有荧光,在合适的激发光照射下,杂交探针及目标DNA能够在荧光显微镜下被清楚地观察到,是一种直观有效的检测方法。
由于传统FISH探针序列的长度较大,导致所需要的杂交时间很长(一般是过夜杂16-18小时),不能及时的得到检测结果,这不利于临床的诊断及治疗。对FISH探针进行改进,缩短杂交时间,提高检测效率,有利于临床的诊断及治疗。
有必要研究出一种新型快速FISH探针的制备方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型人3号染色体探针的制备方法及其应用。
本发明所采取的技术方案是:
新型人3号染色体探针,包括FISH荧光探针,缓冲液和染色液,其中,3号染色体特异性探针的序列为:
探针1:TGAGTTTGGAAACAGTCAGTTTGTA
探针2:CACTTTGAGGCCATTGGTGGAAAAG
探针3:CTTGTCTGTGGAATTTGCAAGGGGA
探针4:CAACTCACAGAGTTTAACCTTTCTT
探针5:CTCAGGAACTACTTTGTGATATGTG
探针6:ATATTTGGACCTCTTTGAGGCTTTC
探针7:ACAGAATCATTCTCAGGAACTACTT
探针8:CTTCCTTTAGACAGTGCAGATTTGA
探针9:CATAATGCTAGACAGAAGAATTCTC
探针10:CTTCTTTTGGGATGTATGTATTCA
探针11:AGTTGAACCTTCCTTTAGACAGAGC
探针12:CACTCTTTTTGTGGAATTTGCAAG
探针13:ATTCTAGCAGTATGAGGCCAATGGT
探针14:CATTCTCAGAAACTGCTTTGTGATG
探针15:CTCTTTGAGGCCTTCGTTGGAAACG
探针16:CATAGAGCAGTTTGGAAAGACTTAG
探针17:CTCAGTAGCTTCTTTGTGTGTGTG
上述检测试剂盒中的使用的探针中,3号染色体特异性探针连接的荧光基团为绿色荧光基团。
优选的,上述探针是在染色体上重复性高,特异性好的短序列。
优选的,上述探针所用缓冲液为:20mM~50mM Tris-HCl(PH8.0~8.8),10mM MgCl2,10%~30%甲酰胺。
优选的,上述探针的杂交温度为42℃,杂交时间为20分钟。
本发明的有益效果是:
本发明试剂盒,采用优化的短序列荧光探针,将原有的FISH检测时间由16~18小时缩短至1~2小时,可以快速、准确地检测出人3号染色体,对未来染色体异常快速检测方法的探究起指示性作用。
附图说明
图1是人3号染色体经本试剂盒荧光探针染色后的镜检结果。
具体实施方式
实施例1:
一、新型人3号染色体探针,包括FISH荧光探针,缓冲液和染色液,其中,3号染色体特异性探针的序列为:
探针1:TGAGTTTGGAAACAGTCAGTTTGTA
探针2:CACTTTGAGGCCATTGGTGGAAAAG
探针3:CTTGTCTGTGGAATTTGCAAGGGGA
探针4:CAACTCACAGAGTTTAACCTTTCTT
探针5:CTCAGGAACTACTTTGTGATATGTG
探针6:ATATTTGGACCTCTTTGAGGCTTTC
探针7:ACAGAATCATTCTCAGGAACTACTT
探针8:CTTCCTTTAGACAGTGCAGATTTGA
探针9:CATAATGCTAGACAGAAGAATTCTC
探针10:CTTCTTTTGGGATGTATGTATTCA
探针11:AGTTGAACCTTCCTTTAGACAGAGC
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