[发明专利]一种与蓝莓耐热能力相关的标记基因及其应用有效
申请号: | 201510211637.X | 申请日: | 2015-04-28 |
公开(公告)号: | CN104830877B | 公开(公告)日: | 2017-11-28 |
发明(设计)人: | 郭卫东;陈侨月;叶美娟;蒋姹琛;郑晓梅;吴晨晨 | 申请(专利权)人: | 浙江师范大学 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙)37236 | 代理人: | 刘晓 |
地址: | 321004 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蓝莓 耐热 能力 相关 标记 基因 及其 应用 | ||
1.一种与蓝莓耐热能力相关的标记基因甲硫氨酸亚砜还原酶A5,其特征在于,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
2.根据权利要求1所述的一种与蓝莓耐热能力相关的标记基因甲硫氨酸亚砜还原酶A5,其特征在于,其能够在高温胁迫下的不同耐热性蓝莓品种中上调表达且程度不同。
3.权利要求1所述的与蓝莓耐热能力相关的标记基因甲硫氨酸亚砜还原酶A5的qRT-PCR引物,其特征在于,以其CDS序列为模板,进行qRT-PCR引物的设计,引物序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。
4.权利要求3所述的qRT-PCR引物的应用,其特征在于,包括以下步骤:
人工模拟气候热胁迫处理‘戴安娜’和待检测蓝莓品种,并提取总RNA,逆转录成cDNA作为模板,以GAPDH为内参基因,其引物序列为SEQ ID No.4和SEQ ID No.5,以权利要求3所述引物为引物,进行qRT-PCR检测鉴定:
qRT-PCR反应体系如下:
反应条件:95℃30s;95℃5s,58℃35s,总共40个循环,进行qRT-PCR检测,并使用2-ΔΔCt法进行计算分析;
检测分子标记相对表达量,如果检测到相对表达量为‘戴安娜’相对表达量1倍以上时,该蓝莓品种可鉴定为耐热品种。
5.根据权利要求4所述的qRT-PCR引物的应用,其特征在于,人工模拟气候热胁迫处理条件为在45℃的光照培养箱中处理6h。
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