[发明专利]一种利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法有效
申请号: | 201510211672.1 | 申请日: | 2015-04-29 |
公开(公告)号: | CN104830923B | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
发明(设计)人: | 仇俊鹏;高建涛;陈桃生;王唐;廖飞;徐振华 | 申请(专利权)人: | 宁夏诚志万胜生物工程有限公司 |
主分类号: | C12P13/14 | 分类号: | C12P13/14;C12R1/225 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 徐淑芬 |
地址: | 751101 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 嗜热乳 杆菌 谷氨酸 生物转化 生产 谷氨酰胺 方法 | ||
1.一种利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在该方法是以L-谷氨酸为反应底物,以嗜热乳杆菌全细胞为生化反应的酶进行生物转化生产L-谷氨酰胺;
上述嗜热乳杆菌全细胞为将斜面保存的嗜热乳杆菌进行摇瓶种子培养和发酵培养,然后离心分离,菌体破碎而得到。
2.按照权利要求1所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于上述摇瓶种子培养和发酵培养所用的培养基组成为:酪朊水解物10 g/L,酵母膏5 g/L,牛肉膏5 g/L,葡萄糖20 g/L,柠檬酸二铵2 g/L,吐温80 1.0 mL/L,KH2PO
3.按照权利要求1或2所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于上述发酵培养条件为:发酵液接种量为5%~15%,pH值为5.5~6.5,培养温度为40℃~45℃,通风量为0.2~1.5vvm,搅拌转速为100~200r/min,发酵时间为15~24h。
4.按照权利要求1所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于上述离心分离是指在4000~6000r/min,4~6℃下离心10~15分钟。
5.按照权利要求1所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于上述菌体破碎采用超声波破碎,超声波工作频率20~25KHz,功率为500W~800W,间歇时间为30s~35s,破碎时间为10~15min。
6.按照权利要求1所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于所述生物转化生产过程为:首先配制质量百分比浓度为15%~20%的L-谷氨酸的水溶液,然后加入其质量的30%~40%的硫酸铵,用碱调整pH值为5.8~6.0,最后加入L-谷氨酸质量的10%~15%的嗜热乳杆菌全细胞,在温度45℃~50℃,搅拌转速200~300r/min的转化条件下进行生物转化。
7.按照权利要求1或6所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征是:在生物转化过程中流加氨水。
8.按照权利要求7所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征是:在生物转化反应开始5h后,根据pH值的变化情况流加一定量的氨水,使反应体系的pH值保持在5.8~6.0。
9.按照权利要求7所述的利用嗜热乳杆菌从L-谷氨酸生物转化法生产L-谷氨酰胺的方法,其特征在于在生物转化过程中,当转化体系连续3小时pH值的变化小于0.1时,反应终止。
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