[发明专利]霍氏肠杆菌CL2013及制备六价铬修复菌剂的方法有效
申请号: | 201510212773.0 | 申请日: | 2015-04-30 |
公开(公告)号: | CN104928207B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 李维宏;岳秀萍;马小丽 | 申请(专利权)人: | 太原理工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01 |
代理公司: | 太原华弈知识产权代理事务所 14108 | 代理人: | 李毅 |
地址: | 030024 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霍氏肠 杆菌 cl2013 制备 六价铬 修复 方法 | ||
1.一种用霍氏肠杆菌CL.2013菌株制备六价铬修复菌剂的方法,所述的霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)CL.2013菌株于2015 年1月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.10451,所述的制备方法包括如下步骤:
(1) 制备菌种活化培养基 在LB培养基中添加葡萄糖1g/L,灭菌15-30min,待用;
(2)制备活化种子 将保藏在斜面试管中的霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei)CL.2013菌株接入(1)制备好的培养基中,在28 -35℃、120-180r/min振荡培养12-16h,得到活化种子;
(3) 制备液体种子培养液 用氢氧化钠水溶液调节万寿菊提取叶黄素的加工废水的pH到6.5-7.5,于115 -121℃灭菌15-30min;
(4)制备液体种子 取(3)制备的培养液中接种(2)制备的活化种子,接种量为8%-10%,于30-37℃、120-200r/min振荡培养24-48 h,得到液体种子;
(5) 制备发酵菌液 在(3)制备的培养液中接种体积比为2%-15%(4)制备的液体种子,于25-35℃,通无菌空气培养12-48 h,当活菌数达到5×108CFU/ ml时,得液体发酵菌液;
(6) 制备万寿菊花渣生物炭 将提取完叶黄素的万寿菊花渣晾干后粉碎至20-100目,放入管式反应炉内,在加热前,往炉内通20-30min气速为250cm3/min的氮气,使反应炉内为无氧环境,在升温速率5℃ /min 的条件下加热至300-600℃,保持3-6h,随后冷却至室温,得到黑色生物碳;
(7)制备六价铬修复固态菌剂 以制备好的生物碳为载体,按照发酵菌液∶生物碳为1︰1.2-5的质量比,将(5)制备发酵菌液添加到(7)制备的生物碳中,充分混合均匀,通风干燥至菌剂含水量在30%以下,包装,存放在阴凉干燥处,得到六价铬修复固态菌剂。
2.一种利用权利要求1所述方法制备的六价铬修复菌剂的使用方法,所述方法是按六价铬污染的程度不同,取一定量的六价铬修复固态菌剂与被污染土壤混合、搅拌均匀,保持土壤含水量在50%-60%、10天以上即可。
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