[发明专利]一种覆盆子叶粗多糖及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种覆盆子叶粗多糖及其制备方法与应用。

背景技术

目前最有前途的替代经典抗生素治疗的抗炎方法之一是使用能增强宿主防御反应的免疫调节剂。现已知的多种免疫调节剂，包括哺乳动物蛋白，如：γ-干扰素、粒细胞集落刺激因子和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及从微生物分离纯化的物质。对于免疫细菌多糖和人工合成的化合物来说，其不良反应和副作用已引起人们广泛注意。大多数高等植物来源的多糖均为无不良反应的物质，不会对机体产生较大的副作用，因此，从植物中分离的多糖在生物医学上引起极大关注。对这些活性物质的作用机制也在不断发展，其中多糖对非特异性诱导的免疫机制更受到人们的重视。研究发现，植物多糖抗肿瘤、杀菌和其他治疗作用的免疫激活机制是通过补体系统的调节和巨噬细胞的刺激来完成。研究发现，植物来源的多糖能通过调节巨噬细胞的免疫功能体现出各种有益的药理作用。植物多糖是抗炎、抗肿瘤和促进伤口愈合的最理想的免疫候选药物。

覆盆子(Rubus chingii Hu)，即掌叶覆盆子，系蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属植物，主产于浙江、福建，此外在安徽、江西、江苏等省也有分布，因其主要分布于华东又称华东覆盆子。覆盆子为《中华人民共和国药典》2010年版一部收录，以其未成熟干燥果实为药用部位，具有补肾、固精、缩尿之功效，用于肾虚遗尿、小便频数、阳痪早泄、遗精滑精等。对于覆盆子果实多糖的研究较多，但是对于覆盆子叶子多糖的研究却没有。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的首要目的在于提供一种覆盆子叶粗多糖的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的覆盆子叶粗多糖。

本发明的再一目的在于提供上述覆盆子叶粗多糖的应用。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种覆盆子叶粗多糖的制备方法，包含如下步骤：

(1)将覆盆子(Rubus chingii Hu)叶子粉碎后过筛，得到覆盆子叶粉；75℃～95℃热水回流提取掌叶覆盆子叶粉，然后将提取液离心，取上层澄清液，过滤2～4次，将滤液减压浓缩，得到多糖溶液；

(2)将多糖溶液和经过预处理的大孔吸附树脂混合，于40℃～60℃水浴2～4h进行脱色，然后过滤出多糖溶液，并用水反复洗出树脂中吸附的多糖，将脱色后的多糖溶液合并，减压浓缩，得到浓缩糖液；

(3)在浓缩糖液中加入3～5倍体积的乙醇进行醇沉，然后离心，弃去上清液，收集沉淀物并干燥，得到覆盆子叶粗多糖(L-Ps)；

步骤(1)中所述的热水回流提取的水料比为(10:1)～(30:1)；

步骤(1)中所述的热水回流提取的时间为2～4h，热水回流提取的次数为2～4次；

步骤(1)中所述的离心的转速为3000～5000rpm/min；所述的离心的时间为8～12min；

步骤(2)中所述的大孔吸附树脂优选为D354FD树脂；

步骤(2)中所述的大孔吸附树脂的预处理的方法为：将大孔吸附树脂先用水浸泡12～24h，然后依次用质量分数为5％的盐酸溶液和质量分数为5％的氢氧化钠溶液各自浸泡0.5～3h，过滤，水洗至中性，得到经过预处理的大孔吸附树脂；

步骤(1)和(2)中所述的减压浓缩的温度为40～60℃；

步骤(3)中所述的乙醇的体积分数为70％～100％；

步骤(3)中所述的醇沉的温度为0～4℃，醇沉的时间为8～24h；

步骤(3)中所述的离心的转速为3000～5000rpm/min；所述的离心的时间为12～15min；

步骤(3)中所述的干燥的温度为40～60℃；

一种覆盆子叶粗多糖(L-Ps)，通过上述制备方法制备得到；

一种覆盆子叶精多糖(L-Ps-1)，通过将上述覆盆子叶粗多糖进一步纯化得到；

所述的覆盆子叶精多糖(L-Ps-1)为均一组分，其分子量(Mn)为12686Da；

所述的覆盆子叶精多糖(L-Ps-1)为包含五种单糖的杂多糖，其中，糖残基摩尔比为：鼠李糖：阿拉伯糖：木糖：葡萄糖：半乳糖＝2.47:4.75:4.12:1:2.48；

所述的覆盆子叶精多糖(L-Ps-1)通过如下步骤制备得到：

(1)将经过预处理的DEAE-52树脂于40～60℃旋转蒸发除气泡后转入Z型层析柱中，用恒流泵泵送蒸馏水以使填料装柱均匀，平衡后流速5～10s/滴；