[发明专利]一种草菇免疫调节蛋白FIP-vvo98及其制备方法

说明书

本发明涉及一种草菇免疫调节蛋白FIP‑vvo98及其制备方法，蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法包括：(1)采用重组载体转化宿主细胞，得到重组菌株；(2)培养重组菌株，诱导重组草菇免疫调节蛋白FIP‑vvo98的表达；(3)超声破碎获取所表达的草菇免疫调节蛋白FIP‑vvo98。根据本发明的对机体具有免疫调节作用的真菌免疫调节蛋白及其基因序列，可以制备出提高人体免疫力的保健食品，防治由于免疫力下降所导致的疾病的危害。

技术领域

本发明属于真菌免疫调节蛋白领域，特别涉及一种草菇免疫调节蛋白FIP-vvo98及其制备方法。

背景技术

利用大型真菌(蘑菇)及其活性物质治疗人类疾病在亚洲国家有着悠久的历史，可以追溯到公元前3000年，由于其在免疫调节和抗癌方面的出色表现，近十年来在西方国家也逐渐受到重视。过去对于大型真菌活性物质的研究多集中在多糖和三萜，对于蛋白质的研究相对较少，但随着生物技术在药物研究和开发中的应用，特别是对中草药中基因、蛋白和药理作用之间关系研究的逐渐深入，真菌蛋白逐步得到了重视，其中真菌免疫调节蛋白(Fungal immunomodulatory protein，FIP)，由于其具有广泛的免疫生物活性，而备受国内外关注。

真菌免疫调节蛋白(Fungal immunomodulatory protein，FIP)是从高等担子菌中分离得到的一类具有免疫调节活性的小分子蛋白质，其结构与功能与植物凝集素和免疫球蛋白重链可变区相似，具有促进淋巴细胞增殖、调控细胞周期、诱发细胞凋亡、影响细胞因子的表达、活化细胞粘附分子和抗过敏反应等免疫调节作用，拥有良好的临床应用前景和药用保健价值。自1989年，日本人Kino从灵芝(Ganoderma lucidum)子实体中分离到第一个真菌免疫调节蛋白，命名为Ling Zhi-8(LZ-8)，并对其基因序列，氨基酸顺序和免疫生理活性进行了测定。到目前为止，共有8种FIPs被分离纯化出来，它们来自于灵芝(Ganodermalucidium)，松杉灵芝(G.tsugae)，紫芝(G.japoncium)，小孢子灵芝(G.microsporum)，甜灵芝(G.sinense)拱状灵芝(G.fornicatum)，金针菇(Flammulina velutipes)和草菇(Volvariella volvacea)，分别被命名为LZ-8(FIP-glu),FIP-gts,FIP-gja(AY987985),FIP-gmi,FIP-sin,FIP-gfo，FIP-fve和FIP-vvo,共同组成了一个新的蛋白质家族–FIPs。在FIPs家族中除了金针菇免疫调节蛋白(FIP-fve)和草菇免疫调节蛋白(FIP-vvo)以外，其他的FIPs都是从不同种灵芝中分离得到的，这说明虽然都是灵芝但由于种类的不同，而具有不同的免疫调节蛋白，甚至同种灵芝中就存在多种免疫调节蛋白。例如叶波平等从灵芝(G.microsporum)中分离到3个蛋白质：LZP-1、LZP-2和LZP-3。体外实验表明3种灵芝蛋白具有较强的促进淋巴细胞增殖活性，而且SDS-PAGE表明其分子量与LZ-8不同，所以他们获得了3种新的灵芝免疫调节蛋白。这样的情况同样发生在草菇中。除了1997年Hsu,H.C.等人在草菇子子实体中通过分离纯化和验证，并经过直接氨基酸测序得到由112个氨基酸组成的分子量约为12.67KDa的一种草菇免疫调节蛋白(FIP-vvo)以外，还有可能存在其它种草菇免疫调节蛋白。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种草菇免疫调节蛋白FIP-vvo98及其制备方法，通过比较基因组等生物信息学方法筛选到一种同样来源于草菇，但基因序列和氨基酸序列都不同于FIP-vvo的具有免疫调节作用的免疫调节蛋白FIP-vvo98，其适用于在保健品和医药中使用。

本发明提供了一种草菇免疫调节蛋白FIP-vvo98，所述蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。该草菇免疫调节蛋白FIP-vvo98全长113个氨基酸，理论分子量为12.81kDa。