[发明专利]用于检测玉米植物DBN9953的核酸序列及其检测方法有效
申请号: | 201510218649.5 | 申请日: | 2015-04-30 |
公开(公告)号: | CN104878092B | 公开(公告)日: | 2018-10-26 |
发明(设计)人: | 丁德荣;康越景;张云珠;刘海利;庞洁;王利君;贾志伟;黄金存;郭函子;王磊;傅学乾;周毅;李风;鲍晓明;吕玉平;张世平 | 申请(专利权)人: | 北京大北农科技集团股份有限公司;北京大北农生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11;C12N5/10;A01N47/44;A01P7/04;A01G7/06;C12N15/82;C12N15/32;C12N15/54;A01H1/02;A01H6/46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 玉米 植物 dbn9953 核酸 序列 及其 方法 | ||
1.一种核酸序列,其特征在于,包括SEQ ID NO:1或其互补序列、和/或SEQ ID NO:2或其互补序列,所述核酸序列源自转基因玉米事件DBN9953,所述转基因玉米事件DBN9953以种子的形式且以保藏编号CGMCC No.10220保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.根据权利要求1所述的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包括SEQ ID NO:3或其互补序列、和/或SEQ ID NO:4或其互补序列。
3.根据权利要求2所述的核酸序列,其特征在于,所述核酸序列包括SEQ ID NO:5或其互补序列。
4.一种检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,包括:
使待检测样品与至少两种引物在核酸扩增反应中接触;
进行核酸扩增反应;
检测扩增产物的存在;
所述扩增产物包括SEQ ID NO:1或其互补序列、和/或SEQ ID NO:2或其互补序列;
所述扩增产物源自转基因玉米事件DBN9953,所述转基因玉米事件DBN9953以种子的形式且以保藏编号CGMCC No.10220保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
5.根据权利要求4所述检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,所述扩增产物还包括SEQ ID NO:6或其互补序列、和/或SEQ ID NO:7或其互补序列。
6.根据权利要求4或5所述检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,所述引物包括第一引物和第二引物,所述第一引物选自SEQ ID NO:1或其互补序列、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:10;所述第二引物选自SEQ ID NO:2或其互补序列、SEQ IDNO:9和SEQ ID NO:11。
7.一种检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,包括:
使待检测样品与探针接触,所述探针包括SEQ ID NO:1或其互补序列、或者SEQ ID NO:2或其互补序列,所述探针源自转基因玉米事件DBN9953,所述转基因玉米事件DBN9953以种子的形式且以保藏编号CGMCC No.10220保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;
使所述待检测样品和所述探针在严格杂交条件下杂交;
检测所述待检测样品和所述探针的杂交情况。
8.根据权利要求7所述检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,所述探针还包括SEQ ID NO:6或其互补序列、或者SEQ ID NO:7或其互补序列。
9.根据权利要求7或8所述检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,至少一个所述探针用至少一种荧光基团标记。
10.一种检测样品中转基因玉米事件DBN9953的DNA存在的方法,其特征在于,包括:
使待检测样品与标记物核酸分子接触,所述标记物核酸分子包括SEQ ID NO:1或其互补序列、或者SEQ ID NO:2或其互补序列,所述标记物核酸分子源自转基因玉米事件DBN9953,所述转基因玉米事件DBN9953以种子的形式且以保藏编号CGMCC No.10220保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;
使所述待检测样品和所述标记物核酸分子在严格杂交条件下杂交;
检测所述待检测样品和所述标记物核酸分子的杂交情况,进而通过标记物辅助育种分析以确定昆虫抗性和/或除草剂耐受性与标记物核酸分子在遗传学上是连锁的。
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