[发明专利]肺结核疗效评价试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种肺结核疗效评价试剂盒，其特征在于，包括酶标板、蛋白标准品组合物，生物素标记抗体组合物；其中所述酶标板分别包被有抗ALB抗体、抗APOA抗体、抗C3抗体、抗ARHGDIB抗体、抗FCN2抗体的五种酶标板；所述蛋白标准品组合物包括ALB、APOA、ARHGDIB、C3和FCN2蛋白标准品；所述生物素标记抗体组合物包括所述生物素标记的抗ALB抗体、生物素标记的抗APOA抗体、生物素标记的抗ARHGDIB抗体、生物素标记的抗C3抗体和生物素标记的抗FCN2抗体。

2.根据权利要求1所述的肺结核疗效评价试剂盒，其特征在于，所述ALB、APOA、ARHGDIB、C3和FCN2蛋白标准品浓度分别为80-120μg/mL，40-60ng/mL，1000-1800pg/mL，25-35μg/mL，12-20ng/mL。

3.根据权利要求1所述的肺结核疗效评价试剂盒，其特征在于，还包括辣根过氧化物酶标记亲和素，稀释液，洗涤液，底物溶液，终止液，酶标板贴纸。

4.根据权利要求3所述的肺结核疗效评价试剂盒，其特征在于，

所述稀释液是含有8g/L NaCl、0.2g/L KCl、1.15-1.8g/L Na₂HPO₄·2H₂O或2.71g/L Na₂HPO₄·7H₂O或3.58g/L Na₂HPO₄·12H₂O、0.2-0.24g/L KH₂PO₄的水溶液；

所述洗涤液是含有8g/L NaCl、0.2g/L KCl、1.15-1.8g/L Na₂HPO₄·2H₂O或2.71g/L Na₂HPO₄·7H₂O或3.58g/L Na₂HPO₄·12H₂O、0.2-0.24g/L KH₂PO₄、0.5-1mL/L的吐温20的水溶液；

所述底物溶液是含有体积比0.8-1.2％的3,3',5,5'-四甲基联苯胺的乙醇溶液；

所述终止液是1.5-3mol/L的H₂SO₄水溶液。

5.一种使用如权利要求1-4中任意一项所述的肺结核疗效评价试剂盒的应用，其特征在于，将所述肺结核疗效评价试剂盒用于评估肺结核病患者治疗效果的评价。

6.根据权利要求5所述的肺结核疗效评价试剂盒的应用，其特征在于包括以下步骤：

(1)采集外周血、离心、吸上清；

(2)将步骤(1)所得上清用所述稀释液稀释，分别加入所述五种酶标板，孵育；

(3)拍干酶标板，分别加入稀释的生物素标记抗体，孵育，用所述洗涤液洗涤；

(4)加入稀释的辣根过氧化物酶标记亲和素，孵育后用所述洗涤液洗涤；

(5)各反应孔中加入新配制的TMB底物溶液，避光孵育；

(6)各反应孔中加入终止液终止反应，在ELISA检测仪上检测各孔OD值；

(7)计算各样本蛋白浓度，带入Logistic逐步模型的回归方程，经计算后评价肺结核病治疗效果。

7.根据权利要求6所述的肺结核疗效评价试剂盒的应用，其特征在于，所述Logistic逐步模型的回归方程为：

Logit(p)＝-0.1617+0.04934×(ALB蛋白浓度)+0.003786×(APOA蛋白浓度)-0.0189×(ARHGDIB蛋白浓度)-0.001431×(C3蛋白浓度)-0.06697(FCN2蛋白浓度)

获得Logit(p)值，通过P＝exp[Logit(p)]/(1+exp[Logit(p)])换算得到P值，以0.5为界，判定肺结核病治疗效果。