[发明专利]异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法。

背景技术

2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(如式Ⅰ所示)是一种重要的合成中间体，可以用于合成利伐沙班。

2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(如式Ⅱ所示)是2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的对映异构体。

一般情况下，2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品中不可避免地会存在有2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮等杂质化合物，检测其中的杂质化合物对于2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品以及利伐沙班的质量控制具有重要的意义。

高效液相色谱是一种常用的检测方法，它分为反相高效液相色谱、正相高效液相色谱：

反相高效液相色谱：采用非极性或相对极性较弱的固定相，以极性较强的溶剂作为流动相，常用于分离、检测非极性和极性较弱的化合物；反相高效液相色谱在现代液相色谱中的应用最为广泛，据统计，它占整个高效液相色谱应用的80％左右。

正相高效液相色谱：采用极性固定相，以相对极性较弱的溶剂作为流动相，常用于分离、检测中等极性和极性较强的化合物。

然而，采用高效液相色谱对2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品进行检测却面临两难的境地：

(1)选用反相高效液相色谱，难以实现2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮与2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的完全分离，造成检测结果不准确；

(2)选用正相高效液相色谱，由于2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮不溶于相对极性较弱的溶剂，也根本无法实施。

现有技术中，也未见报道有2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品的检测方法，给利伐沙班生产过程的质量控制造成了极大的困难。

因此，亟需建立一种检测方法，对2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮产品的质量进行监控。

发明内容

本发明的目的在于提供异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法。

本发明提供的异吲哚二酮类化合物的正相高效液相色谱检测方法，它包括以下步骤：

a、制备异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液：取异吲哚二酮类化合物，加入乙醇，于40℃～70℃下溶解，溶解后冷却至室温，得到异吲哚二酮类化合物的乙醇溶液；

异吲哚二酮类化合物选自2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮、2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮中的任意一种；

b、取步骤a制备的2-[(2R)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为供试品溶液；

取步骤a制备的2-[(2S)-2-羟基-3-[[4-(3-氧代-4-吗啉基)苯基]氨基]丙基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮的乙醇溶液，作为对照品溶液；

c、采用正相高效液相色谱对步骤b的供试品溶液、对照品溶液分别进行检测：

色谱柱的填料：表面涂敷有纤维素-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)的硅胶；

流动相：正己烷-乙醇，正己烷与乙醇的体积比为20％：80％～60％：40％；

检测波长为210nm～270nm；