[发明专利]蓬松型皮胶原止血材料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及了一种具有良好的生物相容性、生物可降解性、低免疫原性等优良生物学性能的蓬松型皮胶原的止血材料的制备，属于生物医用材料领域。

背景技术

在大部分的外科和创伤手术中，会伴随着创面的大量出血，从而使患者面临极大的生命危险，因此制备得到快速有效的止血材料一直是医用领域的研究热点。目前，在手术及创伤修复应用过程中还是以四头带、止血带和绷带等传统止血材料为主，此类传统型的材料止血效果差，消耗大，且不便于保存。近年来，随着对新型快速可吸收止血材料研究的增加，皮胶原由于其良好的生物相容性、低免疫原性及可降解性等优良生物学性能受到研究者的广泛关注。

皮胶原作为一种生物学性能良好的医用材料，与人体具有良好的组织相容性，可降解性且无毒副作用，同时能够促进细胞的粘附、增殖和创口的复合；另一方面，皮胶原特有的微孔结构使得胶原基材料具有很好的渗透性，有利于生物因子的生长扩散；其良好的粘附性，可以诱导并促进成纤维细胞的生长，从而促进伤口的愈合。[（但卫华,李志强,廖隆理,等.皮胶原及其在组织工程中的应用[J].皮革化工,2004,21(5):24-29）]。而对于皮胶原突出的止血性能，也有大量的文献报道。

创面止血和化解疼痛是皮胶原的一大生物医学性能，主要原因在于皮胶原在与创面的接触过程中不仅可以保护创面进一步损伤，而且其超分子结构中游离的氨基酸侧链氨基可以加快血液中血小板的凝聚和激活血液凝固生长因子，从而促使创面止血。[（林炜, 穆畅道, 王坤余, 等. 皮革固体废弃物资源化( Ò ) 胶原的性质及其在医药和化妆品工业中的应用[J].中国皮革.2001,30(15):8~ 11.）（俞耀庭. 生物医用材料[ M] . 天津: 天津大学出版社,2000.）]在创面愈合的过程中，皮胶原通过快速促进细胞生长代谢，可以有效地缩短创面的修复时间。

目前，关于皮胶原较为常见的提取制备方法为酸酶结合提取法，其提取制备技术主要包括原料的预处理、脱脂、酶解消化、盐析、离心、纯化等步骤。根据国内外大量的文献报道，大多研究制备得到的皮胶原存在纯度低、产率低、成本高等问题。另一方面，胶原虽然具有优良的止血性能，但其在生物力学性能方面无法满足止血材料的要求，甚至在其提取制备过程中时有因处理过度使皮胶原进一步水解而失去生物力学性能，因此要进行必要的改性交联来满足止血材料应用过程中所需的力学性能要求。

综上所述，现有技术存在以下不足：

1．现有的胶原可吸收止血材料的制备技术要先从动物皮中提取制备胶原，然后再进行改性交联，最后获得胶原止血材料，其制备步骤繁琐、制备周期长，止血效果一般；

2．现有的皮胶原提取制备技术，提取工艺复杂，会对皮胶原结构造成一定程度的损坏，使其生物力学性能变差，无法达到快速止血的效果；

3．所制备得到皮胶原原料产率低、纯度低且成本高，时有细胞毒性不达标等问题，已经无法满足目前市场的要求。

发明内容

本发明的目的是针对现有相关技术的不足而提供了蓬松型皮胶原止血材料的制备方法，其特点是利用医用纯化猪真皮为原料，经过反复的碱膨胀和酸膨胀，使皮胶原纤维产生充分适度地分离和松散，然后经过特定条件的碳化二亚胺交联改性后获得胶原本体材料，最后通过反复的机械蓬松，使胶原本体进一步蓬松，获得类似棉絮的蓬松型皮胶原止血材料。该材料集成了皮胶原优良的生物学性能和止血材料所要求的生物力学性能，能够进行快速有效止血。

本发明的目的可以由以下制备技术来实现，其制备方法步骤如下：

（1）医用纯化猪真皮前处理： 取医用纯化猪真皮，将其剪成5～20mm×5～20mm的规则小块，接着用生理盐水反复清洗3～5次，再用pH为7.5 的Tris-NaCl缓冲溶液浸泡2～4h；倾去缓冲液，用超纯水继续反复漂洗皮片3～5次，沥水备用；

（2）碱膨胀：向不锈钢转鼓中投入按皮片重2.0％～7.0％的氢氧化钠，超纯水调节液比至3.0～5.0，待氢氧化钠充分溶解后，加入皮片，碱膨胀作用2～4h，检测医用纯化猪真皮的膨胀情况，倾去碱液。之后，按上述碱膨胀工艺重复3～6次，便得到碱膨胀纯化猪真皮；

（3）水洗：加超纯水调节液比为3.0～5.0，常温下水洗10～30min，反复水洗3～5次，倾去废液，沥水；

（4）酸膨胀：将液比为3.0～5.0、pH值为2.0～4.0的醋酸溶液投入不锈钢转鼓对皮片进行酸膨胀处理8～10h，检测纯化猪真皮的膨胀情况，倾去酸液。之后，按上述工艺反复酸膨胀3～6次，得到酸膨胀纯化猪真皮；