[发明专利]一种用于MC-LR快速检测的核酸适配体比色传感器的制备方法在审
申请号: | 201510223809.5 | 申请日: | 2015-05-06 |
公开(公告)号: | CN104897585A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
发明(设计)人: | 赵国华;李修艳 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
地址: | 200092 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 mc lr 快速 检测 核酸 适配体 比色 传感器 制备 方法 | ||
1.一种用于MC-LR快速检测的核酸适配体比色传感器的制备方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)向洁净的三口烧瓶中加入40~60 mL浓度为0.03~0.06 mol/L的氯金酸(HAuCl4)溶液,持续加热至沸腾;磁力搅拌下,将4~6 mL浓度为0.03~0.04 mol/L柠檬酸钠溶液加入到沸腾的HAuCl4溶液中,持续20~40 分钟后停止加热;待溶液冷却至室温,用0.22 μm的滤膜过滤得到金纳米粒子溶胶;
(2)向样品管加入400~450 μL的步骤(1)得到的金纳米粒子溶胶,并分别加入30~40 μL的MC-LR的核酸适配体溶液和20~30 μL的NaCl溶液,反应10~20分钟后,得到核酸适配体比色传感器;其中,使用的MC-LR的核酸适配体的碱基序列为:
5’-GGCGC-CAAAC-AGGAC-CACCA-TGACA-ATTAC
-CCATA-CCACC-TCATT-ATGCC-CCATC-TCCGC-3’。
2.一种如权利要求1所述制备方法得到的核酸适配体比色传感器应用于MC-LR的检测,其特征在于具体步骤如下:
将不同浓度的MC-LR标准溶液分别加入到核酸适配体比色传感器溶液中,室温下培育10~20分钟,用紫外-可见分光光度计分别测定不同样品的紫外-可见吸收光谱,根据吸光度A646/A521的比值与MC-LR浓度的对数之间的线性关系建立工作曲线。
3.一种如权利要求1所述制备方法得到的核酸适配体比色传感器应用于MC-LR的选择性检测,其特征在于具体步骤如下:
向含有核酸适配体比色传感器的溶液中分别加入MC-LR溶液和50倍MC-LR浓度的干扰物溶液,采用紫外-可见分光光度计测定混合液的紫外-可见吸收光谱。
4.根据加入的MC-LR和干扰物引起的金纳米粒子吸光度比值A646/A521的变化实现对MC-LR的选择性分析;其中:所述的干扰物为啶虫脒、草甘膦、敌百虫、四螨嗪或阿特拉津中任一种。
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