[发明专利]高通量测序文库及其构建方法

权利要求书

1.一种高通量测序文库的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：

S1，利用引物混合物对多个目标区域进行多重PCR，得到多个目标片段；

S2，对多个所述目标片段进行接头连接，得到多个带接头的目标片段；以及

S3，对多个所述带接头的目标片段进行乳液PCR，得到所述高通量测序文库；

其中，所述引物混合物为cDNA引物混合物和/或DNA引物混合物；

当所述混合引物为cDNA引物混合物时，所述cDNA引物混合物包括SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的第1对引物以及SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示的第2对引物；

当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物包括SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示的第3对引物以及SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示的第4对引物。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物还包括SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示的第5对引物、SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12所示的第6对引物以及SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14所示的第7对引物。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物还包括SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示的第8对引物、SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18所示的第9对引物、SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20所示的第10对引物、SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示的第11对引物、SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24所示的第12对引物、SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26所示的第13对引物以及SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28所示的第14对引物。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的构建方法，其特征在于，当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物还包括SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30所示的第15对引物、SEQ ID NO：31和SEQ ID NO：32所示的第16对引物、SEQ ID NO：33和SEQ ID NO：34所示的第17对引物、SEQ ID NO：35和SEQ ID NO：36所示的第18对引物、SEQ ID NO：37和SEQ ID NO：38所示的第19对引物、SEQ ID NO：39和SEQ ID NO：40所示的第20对引物以及SEQ ID NO：41和SEQ ID NO：42所示的第21对引物。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物还包括SEQ ID NO：43和SEQ ID NO：44所示的第22对引物、SEQ ID NO：45和SEQ ID NO：46所示的第23对引物、SEQ ID NO：47和SEQ ID NO：48所示的第24对引物、SEQ ID NO：49和SEQ ID NO：50所示的第25对引物、SEQ ID NO：51和SEQ ID NO：52所示的第26对引物、SEQ ID NO：53和SEQ ID NO：54所示的第27对引物以及SEQ ID NO：55和SEQ ID NO：56所示的第28对引物。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，当所述混合引物为DNA引物混合物时，所述DNA引物混合物还包括SEQ ID NO：57和SEQ ID NO：58所示的第29对引物、SEQ ID NO：59和SEQ ID NO：60所示的第30对引物、SEQ ID NO：61和SEQ ID NO：62所示的第31对引物、SEQ ID NO：63和SEQ ID NO：64所示的第32对引物、SEQ ID NO：65和SEQ ID NO：66所示的第33对引物、SEQ ID NO：67和SEQ ID NO：68所示的第34对引物以及SEQ ID NO：69和SEQ ID NO：70所示的第35对引物。