[发明专利]利用变径填充柱增加开管柱上样量的毛细管柱系统

说明书

【技术领域】

本发明涉及毛细管柱系统技术领域，具体地说，是一种利用变径填充柱增加开管柱上样量的毛细管柱系统。

【背景技术】

毛细管开管柱是一种具有中空型特殊结构的色谱分离柱，其固定相通过化学键合或物理涂覆固定在毛细管内表面。独特的结构使其具有柱效高、柱反压小、适合快速分离等优点，而且它避免了整体柱制备过程复杂、重复性难以控制的不足[文献1.Won Jo Cheong et al.Journal of Chromatography A，2013，1308：1-24]，故开管柱的制备与研究一直受到人们的关注。但是开管型毛细管柱一直存在上样量不足的缺陷，再加上长柱稀释，很多检测组分都达不到检测丰度，从而影响其检测灵敏度，较大程度地限制了它的应用与发展。

目前，增加开管柱上样量的方法有很多，如增加柱长、采用多孔固定相[文献2.冠登民，李朝阳，刘明等.原位合成分子筛多孔层毛细管柱的制备与性能考察[J].分析化学，2000，28(12)：1508-1511]及二维毛细管系统[文献3.孙玉娥，关亚风.平面二维毛细管电泳初探[J].色谱，1997，15(2)：106-108]。其中二维毛细管系统应用比较广泛，该系统是将两种分离机理不同的毛细管柱偶联，可以极大地提高系统的峰容量，便捷地调节分离选择性。Zhu等[文献4.朱亚仙，张凌怡，雷雯等.连续二维开管离子交换/反相整体柱毛细管电色谱的构建与评价[J].高等学校化学学报，2011，32(1)：44-49]设计了一种连续二维开管离子交换/反相整体柱，在毛细管电色谱模式下成功分离有机酸。Eskil等[文献5.Eskil Sahlin.Two-dimensional capillary electrophoresis using tangentially connected capillaries[J].Journal of chromatography A，2007，1154(1-2)：454-459]设计了一种拼接式的二维毛细管系统，并成功应用于分离牛血清白蛋白的胰蛋白酶解液。虽然使用二维毛细管系统方法能较大程度增加了上样量，但所用的毛细管都是等径的，存在上样柱过长的问题，影响柱系统重复性和分离效率，而且拼接式的二维毛细管系统的连接处死体积大，影响了检测灵敏度，不利于推广。为此，本发明提出利用变径填充柱增加开管柱上样量的毛细管柱系统及其使用方法。

【发明内容】

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种利用变径填充柱增加开管柱上样量的毛细管柱系统。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种利用变径填充柱增加开管柱上样量的毛细管柱系统，其包括变径填充柱，连接件，开管柱，其特征在于，将变径填充柱固定在连接件的内部手紧接头；开管柱穿过外部手紧接头与填充柱尖端无缝连接，死体积为零。

所述的变径填充柱的入口端内径为320～530μm，出口端内径为75～10μm、柱长为1～5cm。

所述的开管柱内径为75～10μm、柱长为50～500cm。

所述系统采用泵压力或电驱动给变径填充柱上样，由流动相将分析样品带入开管柱进行分离，经过检测器完成检测。

此类毛细管柱系统可应用于毛细管液相色谱和毛细管电色谱。

该柱系统的具体制备方法如下：

(1)将两端同等大内径的石英毛细管一端拉成细口径，在尖端烧制塞子，得到变径毛细管柱，填充色谱填料，制备成变径毛细管填充柱。可根据不同需求，选择不同类型的色谱填料，变径毛细管填充柱的入口端内径为320～530μm，出口端内径为75～10μm，柱长为1～5cm；

(2)通过物理吸附作用或化学键合法制备长开管毛细管柱，根据不同需要制备成不同分离机理的开管毛细管柱，内径为75～10μm，柱长为50～500cm；

(3)用连接件将变径填充柱和开管柱固定并实现零死体积连接。

与现有技术相比，本发明的积极效果是：