[发明专利]参枝苓口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱与应用

权利要求书

1.一种参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取参枝苓口服液，加入甲醇，超声提取，冷藏放置0.5-1小时，恢复至室温，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的肉桂酸、芍药苷、甘草苷、芍药内酯苷、甘草酸铵对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液；

(3)测定：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，记录色谱图；

(4)用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得参枝苓口服液指纹图谱；

步骤(3)中，测定的液相色谱条件为：色谱柱为phenomenex synergi Hydro-RP色谱柱；流动相A为0.3％磷酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱；流动相流速为0.8ml/min；柱温为30℃；检测波长为230nm。

2.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：0-5min，流动相A95％-95％，流动相B 5％-5％；5-10min，流动相A95％-92％,流动相B 5％-8％；10-20min，流动相A92％-80％,流动相B 8％-20％；20-25min，流动相A80％-77.5％,流动相B 20％-22.5％；25-40min，流动相A77.5％-67％,流动相B 22.5％-33％；40-50min，流动相A 67％-60％,流动相B 33％-40％；50-60min，流动相A60％-50％,流动相B 40％-50％；60-80min，流动相A50％-15％,流动相B 50％-85％；80-90min，流动相A15％-5％,流动相B 85％-95％；90-100min，流动相A5％-95％,流动相B 95％-5％。

3.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，冷藏放置的时间为0.5-1小时。

4.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，供试品溶液的制备方法为：精密量取1.25ml参枝苓口服液于25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，超声提取5min，于4℃放置0.5小时，恢复至室温，经0.22μm有机系滤膜过滤，即得供试品溶液。

5.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中，对照品溶液的制备方法为：

精密称取肉桂酸标准品0.0103g，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到肉桂酸溶液，浓度为0.103mg/mL；

精密称取芍药苷标准品0.0302g，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到芍药苷溶液，浓度为3.02mg/mL；

精密称取甘草苷标准品0.0204g，置25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到甘草苷溶液，浓度为0.816mg/mL；

精密称取芍药内酯苷标准品0.0101g，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到芍药内酯苷溶液，浓度为1.01mg/mL；

精密称取甘草酸铵标准品0.0198g，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，得到甘草酸铵溶液，浓度为1.98mg/mL。

6.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，所述色谱柱的填料粒径为4μm，柱长为250mm，柱内径为4.6mm。

7.如权利要求1所述的参枝苓口服液指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，分别精密量取供试品溶液和对照品溶液的体积均为10μL。

8.权利要求1所述的方法构建得到的参枝苓口服液指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱中的共有峰为11个。

9.一种参枝苓口服液的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)待测参枝苓口服液指纹图谱的构建：取待测的参枝苓口服液，按权利要求1所述的方法构建待测的参枝苓口服液的指纹图谱；

(2)将待测参枝苓口服液的指纹图谱与参考样品指纹图谱进行相似性比较，以评价待测参枝苓口服液的质量，计算方法为相关系数法，相似度不低于0.900的口服液质量合格。

10.如权利要求9所述的参枝苓口服液的质量控制方法，其特征在于，步骤(2)中，所述参考样品指纹图谱的构建方法为：首先计算每个样品与其它样品的相似度，然后选择与其它样品相似度之和最大的样品为参考样品，其指纹图谱为参考样品指纹图谱。