[发明专利]一种用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括稀释液、胶乳制剂、空白液、校准品和质控品；其中所述的胶乳制剂中含有分别偶联了抵抗素单克隆抗体以及抵抗素多克隆抗体的不同粒径大小的羧基化的聚苯乙烯胶乳。

2.根据权利要求1 所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述偶联了抵抗素单克隆抗体的羧基化的聚苯乙烯胶乳的粒径为50-80nm，偶联了抵抗素多克隆抗体的羧基化的聚苯乙烯胶乳的粒径为150-200nm。

3.根据权利要求1 所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述稀释液为含有2M NaCl，2％（w/w）PEG20000，0.5%（w/w）BSA，0.1%（w/w）proclin-300 的0.05M pH=8.4的 Tris-HCl 缓冲液。

4.根据权利要求1 所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述空白液为0.05M PBS 磷酸缓冲液。

5.根据权利要求1 所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述校准品包括抵抗素浓度分别为0、0.1、0.5、2.5、10、30μg/L 的校准品。

6.根据权利要求1 所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述的质控品中抵抗素的浓度为0.21-0.29μg/L 。

7.权利要求1~6任一项所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，包括以下步骤：1）稀释液配制；2) 胶乳制剂的配制；3）标准品稀释液的配制；4）标准品的配制；5）校准品及质控品配制；6）胶乳颗粒稀释；7）将检测合格的胶乳微粒工作液进行分装组装成试剂盒。

8.根据权利要求7所述的用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，所述胶乳制剂的配制方法如下：1）羧基化的聚苯乙烯胶乳活化；2）偶联了抵抗素单克隆抗体的羧基化的聚苯乙烯胶乳的制备；3）偶联了抵抗素多克隆抗体的羧基化的聚苯乙烯胶乳的制备；4）将两种胶乳溶液进行混合。

9.权利要求1~6任一项用于测定抵抗素的胶乳增强免疫比浊试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）试剂配置：试剂开瓶即用，缓冲液及乳液试剂在测定前要充分混匀；

2）先加入稀释液试剂，再加入全血样本，37℃反应5min后加入胶乳试剂读取OD570的检测数据；

3）结果计算：以人抵抗素重组蛋白浓度分别为0、0.1、0.5、2.5、10、30μg/L的校准品做标准曲线，样品中的抗原浓度通过标准曲线读出。