[发明专利]一种通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法在审
| 申请号： | 201510225303.8 | 申请日： | 2015-05-04 |
| 公开（公告）号： | CN104829686A | 公开（公告）日： | 2015-08-12 |
| 发明（设计）人： | 王贵荣 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C07K1/32 | 分类号： | C07K1/32 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 杨元焱 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通过 分子 化合物 免疫 共沉淀 分离 目标 蛋白 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，将小分子物质与多肽片段相耦连，制备半抗原载体系统；
步骤二，将步骤一得到的半抗原载体系统免疫动物，提取、分离单克隆抗体；
步骤三，将步骤二得到的抗体固定到磁珠上；
步骤四，在非变性条件下裂解生物细胞，并加入防止蛋白降解的缓冲液，得到含有目标蛋白与小分子物质的溶液；
步骤五，将步骤三得到的磁珠加入到步骤四得到的溶液中进行反应；
步骤六，离心收集磁珠、以及磁珠上的“小分子物质-蛋白”复合体，并进行质谱分析鉴定。
2.根据权利要求1所述的通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法，其特征在于：步骤一所述多肽片段长度为10-20个氨基酸。
3.根据权利要求1所述的通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法，其特征在于：步骤四所述防止蛋白降解的缓冲液包含EDTA0.5-1.0mol/L，4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐1.5-2.0mol/L，抑肽酶1.0-2.0mol/L，E-64蛋白酶抑制剂0.5-1.0mol/L，pH值为7.0-8.5。
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