[发明专利]一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法

权利要求书

1.一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，包括：

(1)将六水合氯化铁溶解在一缩二乙二醇DEG中，然后加入柠檬酸钠Na₃Cit，在空气气氛下60～80℃搅拌，柠檬酸钠完全溶解后加入无水醋酸钠，搅拌至醋酸钠粉末完全溶解，将溶液转移至高压釜中，180～200℃反应3～4小时；自然冷却至室温，离心，弃上清液，用无水乙醇回溶，重复操作2～3次，将沉淀物烘干，得到超小四氧化三铁纳米颗粒；其中，六水合氯化铁、一缩二乙二醇、柠檬酸钠与无水醋酸钠的配比为1.081～1.09g：38～40mL：0.47～0.50g：1.312～1.33g；

(2)分别将Mal-PEG-NH₂和巯基化的RGD溶解于DMSO中，然后将溶解于DMSO中的巯基化的RGD逐滴加入到Mal-PEG-NH₂的DMSO溶液中，持续搅拌反应60～72小时，反应结束后透析，真空冷冻干燥，得到RGD-PEG-NH₂；其中，Mal-PEG-NH₂与RGD的摩尔比为1.5～2：1～1.5；

(3)将步骤(1)中的超小四氧化三铁纳米颗粒分散在DMSO中，超声，分别将EDC和NHS的DMSO溶液加入到超小四氧化三铁纳米颗粒的DMSO的分散液中，搅拌反应2～3小时，将反应结束后的溶液逐滴加入到步骤(2)中RGD-PEG-NH₂的DMSO溶液中反应60～72小时，得到Fe₃O₄-PEG-RGD，透析，然后真空冷冻干燥，即得Fe₃O₄-PEG-RGD；其中，超小四氧化三铁纳米颗粒、EDC与NHS的质量比为160～168：134～144：65～70。

2.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中搅拌的时间为1～2小时。

3.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中离心为8500rpm离心15分钟。

4.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中烘干温度为60℃。

5.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中PEG的分子量为2000。

6.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征如下，所述步骤(2)中透析时用截留分子量为2000的透析袋透析3天，每次透析所用蒸馏水2L，共换水9次。

7.根据权利要求1所述的一种RGD多肽靶向的超小四氧化三铁MRI阳性纳米探针的制备方法，其特征如下，所述步骤(3)中透析时用截留分子量为8000～14000的透析袋透析3天，每次透析所用蒸馏水2L，共换水9次。