[发明专利]N-乙基马来酰亚胺敏感因子在防治乙型脑炎病毒感染中的应用

说明书

本发明涉及生物医学技术领域，是一种抗乙型脑炎病毒(JEV)感染的新靶点及应用。本发明以人脑微血管内皮细胞(HBMEC)作为靶细胞，采用RNA干扰技术下调靶细胞宿主蛋白的表达，来寻找可有效抑制JEV感染人脑微血管内皮细胞(HBMEC)的宿主因子，从而保护血脑屏障的功能，预防病毒穿过血脑屏障感染中枢神经系统。本发明提供了N‑乙基马来酰亚胺敏感因子在防治乙型脑炎病毒感染中的应用，本发明通过实验发现N‑乙基马来酰亚胺敏感因子(N‑ethylmaleimide sensitive factor,NSF)在JEV感染HBMEC中发挥着重要的作用，下调NSF的表达，能明显抑制JEV的感染。本发明提供了NSF在制备预防或治疗乙型脑炎病毒感染药物中的应用。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，是一种抗乙型脑炎病毒感染的新靶点及应用。

背景技术

乙型脑炎病毒又称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV)，属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)，为有包膜的单正链RNA病毒[Gubler,D.,G.Kuno,and L.Markoff.Flaviviruses,p.2007.1153-1252.In D.M.Knipe andP.M.Howley(ed.),Fields virology,5th ed.,vol.1.Lippincott-Williams&Wilkins,Philadelphia,PA.]。JEV为流行性乙型脑炎的病原体，主要以蚊虫为媒介进行传播，感染后能够引发脑炎或脑膜炎等严重的急性神经系统症状，对人类健康威胁巨大。乙型脑炎主要流行于东亚、东南亚以及大洋洲的部分地区，目前主要的控制手段为疫苗预防以及蚊虫的消除，然而全球每年报告的乙型脑炎病例仍有35,000-50,000例，死亡人数超过10,000例[Misra,U.K.and J.Kalita.Overview:Japaneseencephalitis.Prog.Neurobiol.2010.91:108-120.]，由于诊断和报告机制不完善，实际的感染和死亡病例要超过这些数字，可见乙型脑炎仍然是危害公众健康的重大问题，因而研究JEV致病机理和预防手段，寻找新的抗病毒策略，已成为亟待解决的前沿课题。

JEV感染具有嗜神经性，易造成严重的中枢神经系统(CNS)疾病及其并发症，这也是导致乙型脑炎患者发展为重症甚至死亡的主要原因[Denizot M,Neal JW,GasqueP.Encephalitis due to emerging viruses:CNS innate immunity and potentialtherapeutic targets.J Infect.2012.65(1):1-16.]。JEV经血液循环感染CNS需要穿越血脑屏障，然而病毒如何穿过血脑屏障侵入CNS的机制还不清楚。血脑屏障(Blood BrainBarrier，BBB)是位于循环系统和中枢神经系统之间一道主要的屏障，它限制着不同物质在两个部位之间的自由运输，对维持CNS的体内平衡以及保护CNS免受外界病原微生物的侵袭中起着至关重要的作用[Dyrna F,Hanske S,Krueger M,Bechmann I.The blood-brainbarrier.JNeuroimmunePharmacol.2013；8(4):763-73.]。血脑屏障是由无窗孔的脑微血管内皮细胞及其间的紧密连接、星形胶质细胞足突、细胞基膜和周细胞共同组成的一个细胞复合体。在这个细胞复合体中，最主要的物质结构基础是脑微血管内皮细胞(BrainMicrovascular Endothelial Cells，BMECs)及其紧密连接，其严整性的丢失被认为是病毒感染致脑组织损伤的一个重要原因。因此，探明JEV感染BMECs的机制并以此寻找新的抗病毒靶点，对于保护血脑屏障的功能，以及防治JEV所导致的中枢神经系统感染至关重要。