[发明专利]基于CA125抗原的DC细胞、靶向性免疫细胞群及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及DC细胞、靶向性免疫细胞群及其制备方法和用途。

背景技术

恶性肿瘤是人类主要的致死性疾病类型，死亡率居高不下。卫生部最新统计数据表明恶性肿瘤居我国居民前十位死因首位。2010年中国恶性肿瘤发病患者268万人，死亡197万人；目前全国共有恶性肿瘤患者600余万人。每年用于恶性肿瘤病人的医疗费用约占卫生总费用的20％，是全社会最大的医疗负担。目前的治疗手段对于达到治愈、延长恶性肿瘤患者生存期以及改善生活质量等目标的作用仍然十分有限，尤其对于某些类型的恶性肿瘤即使是早期诊断也难以获得满意的疗效，至于转移性、全身性或进展期的恶性肿瘤则更难以治愈。

目前的肿瘤治疗策略中，手术和放疗等局部治疗对局限性肿瘤有较好的疗效，而对于全身性、转移性或局部治疗后的微小残留病灶则主要依靠化疗或免疫疗法进行系统性治疗。肿瘤发病是多步骤、多基因作用的结果，肿瘤细胞表现出生长、分化与凋亡的失控。临床上病人症状的多样性和个体遗传异质性，以及肿瘤远处转移病灶的出现，使肿瘤治疗必须以全身性疾病的观点，采用个体化的综合治疗方案。即根据每个肿瘤病人的特点，采用局部治疗结合全身治疗；不仅要消除局部病灶的肿瘤，还要控制肿瘤的复发、转移生长及肿瘤对重要脏器的侵袭，才能真正有效地提高肿瘤病人的治愈率和生存期。通常肿瘤局部病灶的治疗可采取手术和物理治疗(包括射频消融、热疗、放疗、冷冻、超声波及激光治疗等)方法消除，然而对于影像学不能发现的肿瘤微小病灶(如转移复发灶、局部治疗后的残留病灶、血液中的癌细胞)，以上局部治疗手段则无能为力，必须通过全身性治疗手段加以解决。由于肿瘤的转移、复发、扩散更为致命，因此全身性治疗显得尤为重要和紧迫。目前全身性治疗有传统化学治疗、分子靶向药物治疗、生物治疗(包括干细胞移植治疗和免疫细胞治疗)以及基因治疗等。传统化疗虽然在某些肿瘤治疗方面取得了一些进展，但对延长肿瘤病人生存期方面仍然贡献不大。而且肿瘤细胞对化疗药的天然耐药和获得性多药耐药以及化疗毒性，使化学治疗的发展受到了严重的妨碍。多年来的临床实践证明它并非是全身治疗的优势项目。

免疫细胞治疗是近二十年发展起来的，免疫细胞治疗主要包括CIK和DC细胞。由于它治疗范围广(可用于实体肿瘤及白血病)，特别对肿瘤微小病灶(包括转移、复发灶、血液中的癌细胞)更为有效，无毒副作用，而且适用于肿瘤各阶段(如晚期放、化疗不能使用)；因此它是全身治疗的一个优势项目。免疫细胞治疗对提高生命质量、延长生存期有显著的效果，倍受国内外推崇，是目前全身治疗的最佳手段之一，临床潜力巨大。

然而，目前用于进行免疫细胞治疗的免疫细胞的制备方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种安全、高效的制备DC细胞和靶向性免疫细胞群的方法。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

随着生物治疗技术的发展，对恶性肿瘤进行免疫治疗已成为研究热点，免疫治疗是肿瘤治疗的一种崭新模式，尤其是细胞介导的过继免疫治疗已较为成熟已经进入临床应用阶段，并取得了明显的治疗效果。细胞介导的过继免疫治疗已成为肿瘤患者放、化疗后辅助治疗的重要手段之一，其对于促进患者免疫系统的重建、消除残留病灶及骨髓净化都具有良好效果。人们通过研究淋巴因子－激活的杀伤(LAK)细胞、肿瘤浸润淋巴(TIL)细胞、细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞等，表明CIK细胞是一种新型、高效、具有广谱杀瘤活性的非主要组织相容性复合体(MHC)限制性免疫效应细胞，在肿瘤免疫治疗中显露出巨大的应用价值。树突状细胞(DC)是人体内功能强大的主要的抗原递呈细胞，能诱导出抗原特异性细胞毒淋巴细胞(CTL)反应并可通过直接或间接方式影响β细胞(胰腺的胰岛中能产生胰岛素的细胞)的增殖，活化体液免疫应答。将CIK细胞和DC联合治疗恶性肿瘤，有助于解除肿瘤患者的T细胞免疫无能，有协同抗肿瘤的作用。越来越多的试验和临床实践表明的细胞因子诱导的杀伤细胞联合树突状细胞对恶性肿瘤的治疗(CIK/DC细胞治疗)显示出良好的治疗效果，有着巨大的发展潜力和应用前景。