[发明专利]表达量提高的突变葡萄糖氧化酶及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 201510226869.2 | 申请日： | 2015-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN105002147B | 公开（公告）日： | 2018-06-15 |
| 发明（设计）人： | 聂金梅;李阳源;周银华;陈丽芝;刘金山;李天碧 | 申请（专利权）人： | 广东溢多利生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 519060 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葡萄糖氧化酶 表达量 突变 氨基酸序列 毕赤酵母 编码基因 葡萄糖氧化酶基因 毕赤酵母菌株 定点突变技术 基因工程领域 表达载体 出发菌株 定点突变 酶学性质 突变基因 突变菌株 突变位点 黑曲霉 酶活性 应用 克隆 遗传 筛选 基因 转化 | ||
【权利要求书】：
1.一种突变的葡萄糖氧化酶GOD，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种突变的葡萄糖氧化酶基因，其特征在于，所述基因编码权利要求1所述的突变的葡萄糖氧化酶GOD。
3.根据权利要求2所述的突变的葡萄糖氧化酶基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.包含权利要求2所述的突变的葡萄糖氧化酶基因的重组表达载体。
5.一种构建高表达葡萄糖氧化酶的基因工程菌株的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）将权利要求2所述的突变的葡萄糖氧化酶基因连接到毕赤酵母表达载体，得到重组表达载体；
（2）将获得的重组表达载体转化Pichia pastoris X33得到基因工程菌。
6.一种高表达葡萄糖氧化酶的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）发酵包含权利要求2所述的突变的葡萄糖氧化酶基因的基因工程菌株；
（2）诱导表达葡萄糖氧化酶；
（3）发酵结束后，回收并纯化所表达的葡萄糖氧化酶。
7.权利要求1所述的突变的葡萄糖氧化酶GOD在制备食品或饲料中的应用。
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