[发明专利]一种免疫层析检测试纸及检测方法

说明书

技术领域

本发明属于体外诊断试剂领域，更具体的说，涉及一种免疫层析检测试纸及检测方法。

背景技术

免疫层析法是九十年代兴起的一种基于免疫胶体金技术的快速诊断技术，图1示出了现有技术中免疫层析检测试纸的结构，如图1所示，包括样本垫4、结合物释放垫5、反应膜2、吸收垫3、背衬1，反应膜2包括检测区T和质控区C，其原理是将特异性的抗体先固定于反应膜2上，当试纸的样本垫4浸入待检样本后，由于毛细管作用，待检样本将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，待检样本中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

免疫层析技术大体包括双抗体夹心法、间接法、竞争抑制法。

双抗体夹心法，属于非竞争结合测定，适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原。其基本工作原理是：利用连接于反应膜2上的抗体和标记抗体分别与待检样本中被检测抗原分子上两个抗原决定簇结合，形成标记抗体-抗原-固相抗体免疫复合物。

间接法，测定抗体最常用的方法，属非竞争结合测定。其原理是将抗原固化于反应膜2，待检样本中待测抗体首先与标记分子结合，形成复合物，再与反应膜2上的抗原结合，形成标记分子-待检抗体-抗原复合物。

竞争法可用于抗原和抗体测定。以测定抗原为例，其基本原理是待检样本中的受检抗原和固相的包被抗原竞争与标记抗体结合，当待检样本中的受检抗原的量大于试剂的阈值，标记抗体则不会与固相的包被抗原结合；若待检样本中无受检抗原，标记抗体直接与固相的包被抗原结合。

以胶体金试纸为主要代表的免疫层析试纸技术现已广泛用于免疫检测的各个方面，该技术主要是将特异性的抗体或抗原以条带状固定在反应膜2上，通过检测区T一条条带状检测线8的显色结果进行定性分析，多条条带状检测线8的显色结果进行半定量和定量检测。

现有的免疫层析检测方法及试纸，试纸上的每条检测线8只能提供一种检测信息，在一定面积中增加较多的检测线8数量会给识别造成信息混乱甚至判读错误。

申请号为201210200364.5的发明专利公开了一种胶体金免疫层析定量检测试纸及其检测方法，检测区T上的检测线至少有三条，通过多条检测线与待检测样品的定量结合与检测，实现对待检测样品的定量检测。但是，前后并排设置的检测线相互之间的免疫反应会构成干扰，不利于准确判定结果。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于：提供一种免疫层析检测试纸及检测方法，解决现有免疫层析检测法中多条检测线之间的干扰、无法准确进行结果判定的问题。

本发明解决上述问题的技术方案在于：提供一种免疫层析检测试纸，包括样本垫、结合物释放垫、反应膜、吸收垫、背衬，待检样本液由于毛细管作用沿着所述反应膜移动，所述反应膜包括检测区和质控区，质控区设置有质控线或者质控点，所述检测区设置有2至30个相互独立的检测点且所述检测点之间间隔一定距离，其中，至少有2个检测点在待检样本液移动方向的垂直方向上间隔一定距离；所述检测点包被有抗体或抗原。

在本发明提供的免疫层析检测试纸中，所述检测点的形状为圆点、多边形、卡通图形中的至少一种或者几种的组合。

在本发明提供的免疫层析检测试纸中，根据待检样本中的待检目标物确定所述检测点中包被的抗体或抗原的种类和含量、以及所述检测点的数量。

在本发明提供的免疫层析检测试纸中，待检目标物与所述检测点中包被的抗体或抗原之间的免疫层析反应包括双抗体夹心法、间接法、竞争抑制法。

在本发明提供的免疫层析检测试纸中，所述结合物释放垫上设置有与待检目标物相关的特异性标记物；其中，所述特异性标记物的标记方法包括量子点标记法、胶体金标记法、胶体硒标记法、有色或荧光乳胶标记法、磁性颗粒标记法。

本发明还提供一种免疫层析检测方法，使用前述任意一项所述的免疫层析检测试纸，对待检样本进行定性、半定量或者定量检测

在本发明提供的免疫层析检测方法中，所述待检样本包括来自临床或非临床的血液、体液、尿液、唾液、生殖道分泌液或其他液态样品或粘稠状样品。

在本发明提供的免疫层析检测方法中，在所述样本垫中加入待检样本，免疫层析反应完成后，首先根据所述检测点的显色情况确定待检样本中的待检目标物，再通过肉眼观察检测区中相互独立的检测点的显色情况对待检样本进行定性或者半定量检测，或者，采用具有信号检测功能的仪器采集试纸上检测点的特征信号进行定性、半定量或者定量检测。