[发明专利]一种利用茎节腋芽繁殖香根草种苗的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物种植方法技术领域，提供一种利用茎节腋芽繁殖香根草种苗的方法。

背景技术

香根草(Vetiveria zizanioides L.)，又名培地茅、岩兰草，是一种禾本科多年丛生的草本植物，原产于印度等国，现主要分布于东南亚、印度和非洲等(亚)热带地区，我国主要分布在广东、云南等地。香根草极难结实或不结实，主要靠分蘖繁殖，即每年春季，上年留在田里的香根草根部会萌发新的分蘖，一般情况下，每兜香根草根部在春季可增生40株左右的分蘖。理论上讲，每个分蘖都可以长成独立的具有6-10节的茎，实际上，只有较大分蘖(平均有15株分蘖/兜)形成的茎节数可达6-10节。

香根草具有适应能力强，生长繁殖快，根系发达，耐旱耐瘠等特性，在水土保持，改良生态环境、经济开发利用中有重要的应用，受到国内外的广泛重视并得到迅速的推广。目前国内对香根草的需求较大，种苗供不应求，而导致种苗缺乏的主要原因是繁殖速度过慢。

目前生产上香根草种苗繁殖方式主要通过分离这种新生分蘖苗获得。由于香根草移植过程有一定的死亡率，为了提高香根草移植成活率，根据现有的文献报道和我们的实践经验，应以10株分蘖/穴移栽，成活最高可达95％以上。因此，按照这种方式移栽，香根草繁殖系数只有1:4，即一亩香根草苗圃，最多可移栽4-5亩，而且每年只能移栽一次。因此香根草种苗繁殖系数低，是限制香根草进一步开发利用的主要问题。

为解决该问题，国外的一些研究者正通过组织培养技术来快速繁殖香根草，为香根草的大规模工厂化生产奠定了基础。其方法有二，一是应用香根草外植体(花序组织、叶鞘、茎段、蘖节等组织)诱导愈伤组织，然后分化出再生出新苗。一些研究者应用该方法已经在实验室获得完整香根草幼苗。其生产程序是，先选择外植体，在诱导愈伤组织细胞，在让愈伤组织细胞生芽，再让生芽的愈伤组织细胞生根，最后形成一个完整的植株。

第二个方法是直接利用香根草外植体(如叶鞘、茎段、蘖节等)，通过体细胞发育形成完整植株。其生产程序是，先选择外植体，然后让外植体直接形成无菌芽，接着通过改变培养基使无菌芽增殖，再让生芽外植体生根，最后通过形成一个完整的植株。2005年，上海市农业科学院作物育种栽培研究所的殷丽清等(2005)和广东省东莞市生物技术研究所的郑贵朝等(2005)应用该方法将腋芽(蘖节处着生)成功获得完整植株。殷丽清方法，用70％酒精消毒30s后,再用0.1％升汞溶液消毒15min,无菌水冲洗4-6次,将材料接种在MS加6-BA4.0mg/L的培养基上，30天后无菌芽发生率(＝无菌芽数/腋芽)为72.9％；将无菌芽接种在MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的芽增殖培养上基培养，25天后每个无菌芽的增殖系数(＝新增殖芽数/无菌芽)是1:11.7；将新生芽接种在MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.2mg/L的培养基上,20d后新生芽生根率(＝生根苗数/新芽)达99.1％。郑贵朝方法，用75％酒精消毒30s后,再用0.1％升汞溶液消毒12min,无菌水冲洗3-4次,将材料接种在MS加BA 2.0mg/L的培养基上，20天后无菌芽发生率为60％；将无菌芽接种在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L作为生芽增殖培养基培养时，每个腋芽的增殖系数是1:5.4；将新生芽接MS加NAA 0.2mg/L和IBA 0.5mg/L的生根培养基上，25天后生根率为100％。

目前，现有利用组织培养技术来快速繁殖香根草的方法虽然得到移动程度上的应用，但是仍然存在如下缺点：

1、应用分蘖苗移栽来繁殖香根草，其繁殖系数只有1:4，存在繁殖系数低，而且每年只能移栽一次。

2、应用香根草外植体诱导愈伤组织分化新苗的翻来来提高繁殖系数，存在技术难度大，愈伤组织细胞诱导困难、生芽率低、杂菌污染难以控制等问题，因此不适合大范围推广应用。

3、殷丽清和郑贵朝直接利用香根草腋芽通过体细胞发育形成完整植株的方法，显著提高了芽的繁殖系数。但是，存在以下需要改进的地方：1)没有说明腋芽选取的部位，因为不同茎节位的腋芽形成无菌芽的发生率不同，太嫩的腋芽在升汞处理下会失绿死亡，影响无菌芽发生率；2)我们应用殷丽清和郑贵朝的方法对无菌芽消毒出处理，发现污染率在80％以上，且展芽慢，因此有必要优化该技术环节；3)无菌芽增殖系数偏低，有待提高。

发明内容

本发明的主要目的之一在于提高香根草繁殖系数，提高无菌芽发生率和增殖系数，提供了一种利用茎节腋芽繁殖香根草种苗的方法。

为达到上述目的，采用的技术方案为：