[发明专利]一种鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒及其方法有效
| 申请号： | 201510234887.5 | 申请日： | 2015-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN104774969B | 公开（公告）日： | 2017-05-03 |
| 发明（设计）人： | 朱春红;朱国强;龚建森;陶志云;宋迟;李慧芳;宋卫涛;束婧婷;单艳菊;徐文娟;刘宏祥 | 申请（专利权）人： | 江苏省家禽科学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/42 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙)11312 | 代理人： | 蔡仲德 |
| 地址： | 225125 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 沙门氏菌 多重 pcr 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述多重PCR检测试剂盒包括PCR缓冲液、脱氧核糖核苷三磷酸混合物、Taq DNA聚合酶以及bcf基因、heli基因、rhs基因、sdf基因、fla基因的引物对；
其中，bcf基因的上下游引物分别由SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示；heli基因的上下游引物分别由SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示；rhs基因的上下游引物分别由SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示；sdf基因的上下游引物分别由SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8所示；fla基因的上下游引物分别由SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示。
2.根据权利要求1所述的鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：bcf基因、heli基因、rhs基因、sdf基因、fla基因的引物对的浓度均为10pmole/ml，在PCR反应体系中bcf基因、heli基因、rhs基因、sdf基因、fla基因的引物对的最终浓度为0.6pmole/ml、2pmole/ml、2.6pmole/ml、2.6pmole/ml、2.6pmole/ml。
3.根据权利要求1所述的鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：PCR缓冲液为10×PCR缓冲液，10×PCR缓冲液包括100mM KCl、80mM(NH4)SO4、pH为9.0的100mM Tris-HCl、15mM MgCl2和0.5％Tergitol-type NP-40。
4.根据权利要求1所述的鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：脱氧核糖核苷三磷酸混合物中dGTP、dCTP、dATP、dTTP的浓度均为25mM，在PCR反应体系中dGTP、dCTP、dATP、dTTP的最终浓度均为0.5mM。
5.根据权利要求1所述的鉴定禽源沙门氏菌的多重PCR检测试剂盒，其特征在于：Taq DNA聚合酶的浓度为2.5U/μl，在PCR反应体系中Taq DNA聚合酶的最终浓度0.125U/μl。
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