[发明专利]长链非编码RNA AFAP1-AS1的原位杂交探针、试剂及其应用

权利要求书

1.长链非编码RNA AFAP1-AS1的应用方法，其特征在于，用于制备鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的制剂，该长链非编码RNA AFAP1-AS1的序列如SEQ NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的应用方法，其特征在于，所述的鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的制剂为原位杂交检测试剂。

3.根据权利要求2所述的应用方法，其特征在于，

所述的原位杂交检测试剂中包括用于原位杂交检测AFAP1-AS1表达的寡核苷酸探针，序列如下：

AFAP1-AS1探针1：5’-ATTCCTTTATTTTATGGGATGTTCTGTAGGGAGTT-3’

AFAP1-AS1探针2：5’-TAGAAATGAGAAAAGAATCACCAAGAGAGTAAGCA-3’

AFAP1-AS1探针3：5’-TCCCTACAGCTAGTTTCCTCTTCATTTATTCATTT-3’。

4.根据权利要求2或3所述的应用方法，其特征在于，

所述的原位杂交检测试剂为试剂盒。

5.根据权利要求4所述的应用方法，其特征在于，

试剂盒中含有用于原位杂交检测AFAP1-AS1表达的寡核苷酸探针：

AFAP1-AS1探针1：5’-ATTCCTTTATTTTATGGGATGTTCTGTAGGGAGTT-3’

AFAP1-AS1探针2：5’-TAGAAATGAGAAAAGAATCACCAAGAGAGTAAGCA-3’

AFAP1-AS1探针3：5’-TCCCTACAGCTAGTTTCCTCTTCATTTATTCATTT-3’，

试剂盒中还含有阳性对照探针，

GAPDH探针1：5'-CCACTTTACCAGAGTTAAAAGCAGCCCTGG-3'

GAPDH探针2：5'-CAGTAGAGGCAGGGATGATGTTCTGGAGAG-3'

GAPDH探针3：5'-GTCAGAGGAGACCACCTGGTGCTCAGTGTA-3'。

6.根据权利要求4所述的应用方法，其特征在于，

试剂盒中还含有：地高辛寡核苷酸加尾试剂、抗地高辛-辣根过氧化物酶复合物检测试剂、DAB染色试剂；

其它常规生物化学试剂，包括20x SSC，硫酸葡聚糖，去离子甲酰胺，多聚腺苷酸，多聚脱氧腺苷酸，变性剪切的蛙精DNA，酵母转运RNA，二硫苏糖醇，50xDenhardts’s solution，PBS buffer，胃蛋白酶K，牛血清白蛋白，三乙醇胺，醋酸酐，

TNB缓冲液：pH7.5的0.1M Tris-Cl+0.15M NaCl+0.5％阻断试剂；

TNT缓冲液：pH7.5的0.1M Tris-Cl+0.15M NaCl+0.05％Tween 20。

7.用于制备鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的原位杂交检测试剂的寡核苷酸探针，序列如下：

AFAP1-AS1探针1：5’-ATTCCTTTATTTTATGGGATGTTCTGTAGGGAGTT-3’

AFAP1-AS1探针2：5’-TAGAAATGAGAAAAGAATCACCAAGAGAGTAAGCA-3’

AFAP1-AS1探针3：5’-TCCCTACAGCTAGTTTCCTCTTCATTTATTCATTT-3’。

8.用于鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的原位杂交检测试剂，是包含有权利要求7所述的寡核苷酸探针的试剂盒。

9.根据权利要求8所述的原位杂交检测试剂，其特征在于，试剂盒中还含有阳性对照探针：

GAPDH探针1：5'-CCACTTTACCAGAGTTAAAAGCAGCCCTGG-3'

GAPDH探针2：5'-CAGTAGAGGCAGGGATGATGTTCTGGAGAG-3'

GAPDH探针3：5'-GTCAGAGGAGACCACCTGGTGCTCAGTGTA-3'。

10.根据权利要求8或9所述的原位杂交检测试剂，其特征在于，

试剂盒中还含有：地高辛寡核苷酸加尾试剂、抗地高辛-辣根过氧化物酶复合物检测试剂、DAB染色试剂；

其它常规生物化学试剂，包括20x SSC，硫酸葡聚糖，去离子甲酰胺，多聚腺苷酸，多聚脱氧腺苷酸，变性剪切的蛙精DNA，酵母转运RNA，二硫苏糖醇，50xDenhardts’s solution，PBS buffer，胃蛋白酶K，牛血清白蛋白，三乙醇胺，醋酸酐，

TNB缓冲液：pH7.5的0.1M Tris-Cl+0.15M NaCl+0.5％阻断试剂；

TNT缓冲液：pH7.5的0.1M Tris-Cl+0.15M NaCl+0.05％Tween 20。