[发明专利]一种抑制肺癌细胞转移的组合药物以及检测方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种抑制肺癌细胞转移的组合药物以及肺癌细胞转移的检测方法。

背景技术

肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤，近年来的发病率和死亡率增长最快，对人类健康安全的威胁也越来越大。恶性肿瘤是危害人类生命健康的细胞性疾病，肿瘤细胞从生物体内正常细胞转化为恶性细胞，其形态、功能、代谢和增殖等都会发生变化，可以看作是细胞的异常分化导致其具有永生性。

水飞蓟宾(Silybin)是从菊科药用植物水飞蓟种子的种皮中提取所得的一种天然黄酮木脂素类化合物。水飞蓟宾呈黄色粉末，味苦，可溶于丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇，微溶于氯仿，几乎不溶于水。其分子式为C₂₅H₂₂O₁₀，摩尔质量为482.12。水飞蓟宾临床上主要用于治疗中毒性及酒精相关性肝病的治疗，还可作为抗氧化食品添加剂。药理学研究表明，水飞蓟宾能够清除机体内自由基，延缓衰老，对抗脂质过氧化，抑制一氧化氮的产生，减轻对组织细胞的毒素，保护肝细胞膜、改善肝功能，降血脂和保护心肌等作用。孙羿等在《水飞蓟宾对人膀胱癌细胞株5637增殖的抑制作用及其机制》一文中指出水飞蓟宾可抑制人膀胱癌细胞株5637的增殖，并能降低凋亡抑制因子Survivin的mRNA表达。中国专利申请201010238453.X公开了水飞蓟宾在治疗神经受损方面的用途。

替加氟是氟尿嘧啶的衍生物，在体内经肝脏活化逐渐转变为氟尿嘧啶而起抗肿瘤作用，能干扰和阻断DNA、RNA及蛋白质合成，主要作用于S期，是抗嘧啶类的细胞周期特异性药物。药理学研究表明，替加氟对胃癌、结肠癌、直肠癌、胰腺癌、乳腺癌和肝癌具有一定的疗效。

DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂是一类能够抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ活性的物质。肿瘤细胞中的DNA拓扑异构酶Ⅰ的含量和活性远高于正常体细胞，因此，DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂能选择性抑制肿瘤细胞的生长增殖，从而发挥抗肿瘤作用。谭慧心等在《拓扑异构酶Ⅰ抑制剂研究进展》一文中指出“迄今有关各类抑制剂与拓扑异构酶Ⅰ和/或DNA的作用机制尚不明确，而且多数拓扑异构酶Ⅰ抑制剂存在结构复杂、特异性不高、毒性较大的缺点。”包括伊立替康在内的替康类是常用的DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，主要用于大肠癌、食管癌和胃癌等的治疗。

目前，市场上仍缺少可以显著抑制肺癌细胞转移的组合药物。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种抑制肺癌细胞转移的组合药物，并提供了相应的肺癌细胞转移的检测方法。

一种抑制肺癌细胞转移的组合药物，包括水飞蓟宾、替加氟和DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂；所述肺癌细胞选自非小细胞肺癌细胞株A549。

发明人对现有的具有抗癌效果的药物进行了大量筛选和复配，预料不到地发现：通过水飞蓟宾、替加氟和DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂以一定重量比组合得到的组合药物具有良好的肺癌细胞抑制效果，且可显著抑制肺癌细胞的转移。

通常情况下，水飞蓟宾主要用于肝脏疾病的治疗，替加氟主要用于治疗消化系癌。DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂虽然具有较广泛的抗癌作用，但尚无文献报道DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂可与水飞蓟宾、替加氟联合作为组合药物联合使用。替加氟即1-(四氢-2-呋喃基)-5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮。

优选地，所述组合药物中，水飞蓟宾、替加氟和DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的质量比为(1~2)：(1~2)：(0.5~1)。

优选地，所述组合药物中，水飞蓟宾、替加氟和DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的质量比为2：2：1。

优选地，所述DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂选自贝洛替康、卢比替康、依沙替康、托泊替康、伊立替康或其可药用盐。

优选地，所述组合药物由水飞蓟宾、替加氟、DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂和药学上可接受的载体制得。

优选地，所述组合药物为注射剂。

相应地，本发明还提供一种肺癌细胞转移的检测方法，包括如下步骤：A）培养肺癌细胞，所述肺癌细胞选自非小细胞肺癌细胞株A549，采用所述的组合药物对所述肺癌细胞进行处理；B）采用胰酶消化所述肺癌细胞，并用不含胎牛血清的基础培养基重悬细胞；C）进行细胞计数后，对细胞悬液进行稀释；D）将细胞悬液加入至Transwell小室，并加入含胎牛血清的培养基至Transwell小室下方的培养孔里，于培养箱中进行培养后，用甲紫染色，显微镜下检测所述肺癌细胞的转移。