[发明专利]一种PLA2R抗体检测试纸条及制作、检测方法有效
申请号: | 201510245291.5 | 申请日: | 2015-05-14 |
公开(公告)号: | CN104880560B | 公开(公告)日: | 2017-04-12 |
发明(设计)人: | 熊祖应;张永顶;马伟民;张大准 | 申请(专利权)人: | 深圳市伯劳特生物制品有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/564 |
代理公司: | 深圳市百瑞专利商标事务所(普通合伙)44240 | 代理人: | 杨大庆,叶绿林 |
地址: | 518054 广东省深圳市南山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 pla2r 抗体 检测 试纸 制作 方法 | ||
1.一种PLA2R抗体检测试纸条,包括在粘性底板上依次搭接的样本垫、结合物垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;其特征在于:所述的结合物垫上喷涂有PLA2R偶联的量子点,所述的硝酸纤维素膜上包被有PLA2R抗原作为检测线,硝酸纤维素膜上还包被有PLA2R抗体作为质控线。
2.根据权利要求1所述的PLA2R抗体检测试纸条,其特征在于:所述量子点为包括ⅠB、ⅡB、ⅢA、ⅣA、ⅤA、ⅥA族中的两种以上元素组成的单个晶核结构或是核壳结构。
3.根据权利要求2所述的PLA2R抗体检测试纸条,其特征在于:所述量子点表面还设置有表面修饰基团。
4.根据权利要求3所述的PLA2R抗体检测试纸条,其特征在于:所述表面修饰基团为-COOH、-NH2、-SH或-CHO。
5.根据权利要求1至4任意一项所述的PLA2R抗体检测试纸条,其特征在于:所述量子点的粒径范围为2~1000nm,激发光波长范围为200~600nm,发射光波长为400~800nm。
6.一种PLA2R抗体检测试纸条的制作方法,其特征在于:包括以下步骤:
a.用量子点偶联PLA2R得到量子点-PLA2R复合物,并将其喷涂在结合物垫上;
b.分别将PLA2R包被到硝酸纤维素膜上作为检测线,将PLA2R抗体包被到硝酸纤维素膜上作为质控线,检测线和质控线间的距离为3~10mm。
c.在粘性底板上依次搭接样本垫、喷涂有量子点-PLA2复合物的结合物垫、设置有检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸,并裁切成所需宽度即为PLA2R抗体检测试纸条。
7.根据权利要求6所述PLA2R抗体检测试纸条的制作方法,其特征在于:所述步骤b的具体制作方法为:分别用0.005-0.2M,pH6.0-pH9.0的包被缓冲液稀释PLA2R和PLA2R抗体至0.1-5mg/ml,所述包被缓冲液为磷酸盐缓冲液、硼砂、碳酸盐缓冲液,可含糖、醇类中的一种。用划膜仪或喷膜仪分别将PLA2R和PLA2R抗体包被到硝酸纤维素膜上,包被浓度为0.4-2μl/cm;喷涂完毕后,放置在环境湿度为30%以下,温度在16℃-45℃的环境中,烘干1h以上,封存。
8.根据权利要求6所述PLA2R抗体检测试纸条的制作方法,其特征在于:所述步骤a的具体制作方法为:将PLA2R加入到量子点溶液中或是将量子点加入到PLA2R溶液中偶联得到量子点-PLA2R复合物;
将量子点-PLA2R复合物稀释5-200倍,用喷膜仪按2-100μl/cm的量喷涂到结合物垫上,在环境湿度小于30%,温度在35-37℃的环境下烘烤1-5h,干燥后封存。
9.一种PLA2R抗体检测试剂盒,包括设置在试剂盒内的检测卡和样品缓冲液,其特征在于:所述检测卡包括上壳体和下壳体,所述上壳体与下壳体间放置有PLA2R抗体检测试纸条,所述上壳体上设置有加样孔、观察窗和信息区,所述加样孔与PLA2R抗体检测试纸条上的样本垫对应,观察窗与硝酸纤维素膜上的检测线和质控线对应;所述信息区上喷涂有用于识别病人ID的二维码、条形码或磁卡;所述试剂盒上还设置有标定芯片。
10.一种PLA2R抗体的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)先用试剂盒上的标定芯片标定荧光分析仪,保存标定数据;
2)取10微升血清或血浆样品,或15微升全血样品加入样品缓冲液,混合后10秒钟,加入检测卡加样孔;
3)将检测卡插入荧光分析仪的检测孔,放置3-4分钟,荧光分析仪即可读出PLA2R抗体的浓度值。
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