[发明专利]一种基于一步PCR技术进行凡纳滨对虾遗传性别鉴定的方法有效
| 申请号： | 201510245995.2 | 申请日： | 2015-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN104789691B | 公开（公告）日： | 2018-02-13 |
| 发明（设计）人： | 于洋;李富花;张晓军;相建海 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 一步 pcr 技术 进行 凡纳滨 对虾 遗传 性别 鉴定 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于一步PCR技术进行凡纳滨对虾性别鉴定的方法，其特征是：提取对虾的基因组DNA，采用一对特异性引物进行一步PCR扩增，PCR产物进行电泳检测，最后根据电泳结果进行对虾性别鉴定，在雌性个体的DNA中有特异性扩增产物，而在雄性个体中无特异性扩增产物，即实现了对虾的性别鉴定；
所述的特异性引物为：
LvSDASF：AAGACAATGATTTTGAAG
LvSDASR：AAGAAACCGTGGGGGAAG。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征是：PCR扩增的扩增体系如下：
10mmol/L脱氧核苷酸混合物0.4μL，10×ExTaq DNA聚合酶缓冲液2.5μL，2.5U/μL ExTaq DNA聚合酶0.5μL,LvSDPF和10μmol/L LvSDPR各0.5μL，50ng/μL基因组DNA模板2μL，双蒸水补足25μL；PCR反应程序为95℃预变性10min，扩增35个循环，循环参数为95℃30sec，53℃30sec，72℃30sec，最后72℃延伸10min。
3.按权利要求1所述的方法，其特征是：所述电泳检测是通过琼脂糖凝胶电泳分析；根据电泳结果实现对虾的性别鉴定方法为：如果待分析个体的扩增产物经电泳后在350bp处有一条特异带，则该个体为雌性个体，如果电泳后无特异条带，则该个体为雄性个体。
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