[发明专利]基于pH计的酶联免疫吸附测定方法有效
申请号: | 201510248482.7 | 申请日: | 2015-05-17 |
公开(公告)号: | CN104849443A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 张云;聂瑾芳;杨佳妮;范金龙;高东 | 申请(专利权)人: | 桂林理工大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 541004 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 ph 免疫 吸附 测定 方法 | ||
1.一种基于pH计的酶联免疫吸附测定方法,其特征在于具体步骤为:
步骤一,在酶标板中包被单克隆抗体或抗原;
步骤二,以牛血清白蛋白为封闭剂进行封闭;利用抗原-抗体特异性免疫反应,捕获样本中的分析物抗原或抗体,并进一步结合生物素标记的抗体或二抗;
步骤三,利用生物素-亲和素特异性反应,将链霉亲和素与葡萄糖氧化酶同时标记的微米或纳米颗粒捕获到酶标板表面;
步骤四,加入葡萄糖与葡萄糖氧化酶进行催化反应;
步骤五,最后使用pH计量测含有萄糖酸的混合产物溶液的pH值,pH值的大小与样本中分析物抗原或抗体的浓度呈负相关,即完成基于pH计的酶联免疫吸附测定;
所述的将链霉亲和素与葡萄糖氧化酶同时标记的微米或纳米颗粒捕获到酶标板表面,是根据不同的目标分析物对象,采用的抗原-抗体特异性免疫反应模式为双抗体夹心法、双抗原夹心法、间接法、竞争法和捕获包被法中的一种;
所述pH计为台式pH计、便携式pH计和便携式pH笔中的一种。
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