[发明专利]一种融合蛋白及其制备方法在审
| 申请号： | 201510251264.9 | 申请日： | 2015-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN104804100A | 公开（公告）日： | 2015-07-29 |
| 发明（设计）人： | 吴芩;刘扬中 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;A61K49/00;A61K49/14 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 230026 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 融合 蛋白 及其 制备 方法 | ||
1.一种融合蛋白，包括超正电荷绿色荧光蛋白和镧系离子结合肽。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，所述超正电荷绿色荧光蛋白为
(1)表面带有36个正电荷的绿色荧光蛋白；
(2)表面带有48个正电荷的绿色荧光蛋白；
或(3)在带有36个正电荷的绿色荧光蛋白或表面带有48个正电荷的绿色荧光蛋白的氨基酸序列中取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸获得具有同等功能的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，所述镧系结合肽为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的N次串联，N为≥1的整数。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的融合蛋白，所述超正电荷绿色荧光蛋白与所述镧系离子结合肽由连接子连接，所述连接子的序列为(GGS)n，其中n为≥3的整数。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的融合蛋白，所述融合蛋白具有如SEQ ID NO:4-6所示的氨基酸序列或在SEQ ID NO:4-6所示的氨基酸序列中取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸获得的具有同等功能的氨基酸序列。
6.编码权利要求1-5任意一项所述融合蛋白的DNA分子。
7.一种重组DNA载体，含有权利要求6所述DNA分子。
8.一种宿主细胞，含有权利要求7所述重组DNA载体。
9.权利要求1所述融合蛋白的制备方法，包括：
步骤1：获取编码超正电荷绿色荧光蛋白的DNA分子，获取编码连接子和镧系离子结合肽的DNA分子；
步骤2：将编码超正电荷绿色荧光蛋白的DNA分子与编码连接子和镧系离子结合肽的DNA分子连接与表达载体融合，构建重组表达载体；
步骤3：重组表达载体转化宿主细胞，诱导含重组表达载体的宿主细胞表达融合蛋白，分离、纯化表达的融合蛋白。
10.权利要求1-5任意一项所述融合蛋白在制备荧光和磁共振的双模式的成像剂中的应用。
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