[发明专利]用于在去偶联条件和/或安全操作范围下产生不含C5烃的异戊二烯的方法和组合物

权利要求书

1.能够产生异戊二烯的培养的细胞，其中所述的细胞处于稳定期，且其中异戊二烯产量大于或约2倍于在生长期相同时间产生的异戊二烯的量。

2.权利要求1的细胞，其中所述异戊二烯在气相产生，且

(a)其中所述气相包含大于或约9.5％(体积)的氧，且所述气相中异戊二烯的浓度小于自燃的下限或大于自燃的上限，或

(b)所述气相中异戊二烯的浓度小于自燃的下限或大于自燃的上限，且所述细胞产生大于约400nmole/g_wcm/hr的异戊二烯。

3.培养的细胞，其产生大于约400nmole/g_wcm/hr的异戊二烯，其中所述细胞在异戊二烯的产生与细胞生长去偶联的条件下生长。

4.培养的细胞，其具有大于约0.1mg/L_培养液/hr的异戊二烯的平均容积生产力，其中所述细胞在异戊二烯的产生与细胞生长去偶联的条件下生长。

5.培养的细胞，其从细胞培养基转化超过约0.002摩尔百分比的细胞消耗的碳为异戊二烯，其中所述细胞在异戊二烯的产生与细胞生长去偶联的条件下生长。

6.权利要求1至5中任一项的细胞，其中所述细胞在葡萄糖受限条件下生长。

7.权利要求1至6中任一项的细胞，其中在稳定期产生的异戊二烯的量大于或约2、3、4、5、10、20、30、40、50或更多倍于在生长期相同时间产生的异戊二烯的量。

8.权利要求1至7中任一项的细胞，其还包含编码异戊二烯合酶多肽的异源核酸。

9.组合物，其包含大于约2mg由权利要求1的细胞产生的异戊二烯，且与该组合物中的全部C5烃的总重量相比，其包含以重量计大于或约99.94％的异戊二烯。

10.组合物，其包含大于或约2、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900，或1000毫克权利要求1的细胞产生的异戊二烯。

11.组合物，其包含大于或约2、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100克权利要求1的细胞的挥发性有机级分的异戊二烯(w/w)。

12.组合物，其包含大于约2mg权利要求1的细胞产生的异戊二烯，且包含小于或约0.5μg/L化合物，所述化合物用于抑制异戊二烯聚合的组合物中的任意化合物。

13.权利要求12的组合物，其中所述抑制异戊二烯聚合的组合物与该组合物中全部C5烃的总重量相比，包含以重量计小于或约0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0.005、0.001、0.0005、0.0001、0.00005或0.00001％的一种或多种C5烃，所述C5烃选自：1,3-环戊二烯、顺式-1,3-戊二烯、反式-1,3-戊二烯、1-戊炔、2-戊炔、1-戊烯、2-甲基-1-丁烯、3-甲基-l-丁炔、反式-戊间二烯、顺式-戊间二烯、戊-4-烯-1-炔、反式-戊-3-烯-1-炔或顺式-戊-3-烯-1-炔。

14.权利要求12的组合物，其中所述抑制异戊二烯聚合的组合物与该组合物中全部C5烃的总重量相比，具有以重量计小于或约0.12、0.10、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0.005、0.001、0.0005、0.0001、0.00005或0.00001％的1,3-环戊二烯、顺式-1,3-戊二烯、反式-1,3-戊二烯、1-戊炔、2-戊炔、1-戊烯、2-甲基-1-丁烯、3-甲基-l-丁炔、反式-戊间二烯、顺式-戊间二烯、戊-4-烯-1-炔、反式-戊-3-烯-1-炔或顺式-戊-3-烯-1-炔。

15.组合物，其包含大于约2mg权利要求1的细胞产生的异戊二烯，且与该组合物中全部C5烃的总重量相比，具有以重量计大于或约99.90、99.92、99.94、99.96、99.98或100％异戊二烯。

16.权利要求15的组合物，其中所述异戊二烯回收自废气部分。