[发明专利]一种纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法

权利要求书

1.一种纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，包括步骤：

a、对酶催化反应所得反应液先后进行微滤和纳滤，收集浓缩液备用；

b、然后在浓缩液中加入磷酸或盐酸调节pH至3-5，用反相色谱柱为固定相，以缓冲盐溶液为A相、乙醇为B相，进行梯度洗脱纯化；

c、对步骤b所得的滤液进行纳滤，最后用真空冷冻干燥机冻干;

所述步骤b中反相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;采用HCl回流法对所述十八烷基硅烷键合硅胶进行预处理;

所述步骤b中缓冲盐溶液为甲酸和氢氧化钠配成的浓度为20mM的缓冲盐溶液；

所述步骤b中缓冲盐溶液的pH为3-5；

所述步骤b中A相和B相的体积比大于3：97，小于1；

所述步骤b 中梯度为3% ～ 15% B%。

2.根据权利要求1所述的纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，所述步骤a中纳滤采用的纳滤膜为截留分子量200的中空纤维膜。

3.根据权利要求1所述的纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，所述步骤a中浓缩液的浓度为30-50g/L。

4.根据权利要求1所述的纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，所述步骤b中梯度洗脱时间为40min。

5.根据权利要求1所述的纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，所述步骤b中检测波长为260 nm。

6.根据权利要求1所述的纯化氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法，其特征在于，所述步骤c纳滤浓缩后的溶液浓度为100~150g/L。