[发明专利]抗eLtaS蛋白的人源化抗体与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学领域中抗eLtaS蛋白的人源化抗体与应用。

背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)属葡萄球菌属，是人类的一种重要病原菌，能够引起肺炎、心内膜炎、烧伤及战伤感染、败血症、中毒性休克等多种严重感染(Lowy FD.New Engl J Med.1998；339,520-532)，它是革兰氏阳性菌脓毒血症的主要致病菌，也是烧伤创面感染、急性肝衰竭的重要病原菌(姚咏明等，脓毒症研究的若干新动态2000；13,517-519)。其能够在人群密集的区域通过飞沫、接触进行大规模传播。更为严重的是，金黄色葡萄球菌耐药性不断增强，如1961年发现的对β-内酰胺类抗生素耐药的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，2002年10月又发现了耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA)。2007年10月，Klevens R M等调查表明美国2005年感染MRSA的人数超过9万人，感染MRSA的病人死亡率为19.8％，死亡人数超过HIV感染的死亡人数(Klevens RM,et al.JAMA.2007；298:1763-1771)。今天细菌耐药性的出现正在逆转过去80年抗生素创造的奇迹，许多细菌感染的治疗药物选择变得日益有限和昂贵，某些情况下甚至根本无药可用,抵抗细菌感染亟需新的更有效的治疗策略。

LtaS(Lipoteichoic acid synthase,LTA合成酶)是金黄色葡萄球菌的细胞膜蛋白之一，全长646aa，N端位于胞内，C端位于胞外，有5个跨膜区，其功能区位于胞外，与金黄色葡萄球菌细胞壁主要成分LTA(Lipoteichoic acid)的合成密切相关。I型多肽酶SpsB可以水解全长LtaS并将其胞外区eLtaS(218-646aa)释放于细菌生长上清中。申请人在实验过程中证实在小鼠急性腹膜炎模型和肺炎模型中eLtaS可以显著加重金黄色葡萄球菌对小鼠的感染，从而证实其为金黄色葡萄球菌重要毒力因子之一；进一步还证实针对eLtaS蛋白的中和性单克隆抗体E4-2可以在小鼠腹膜炎模型和肺炎模型中有效抵抗金黄色葡萄球菌对小鼠的感染。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何预防及治疗金黄色葡萄球菌所致疾病。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了抵抗金黄色葡萄球菌感染的抗eLtaS蛋白的人源化抗体。

本发明所提供的抗eLtaS蛋白的人源化抗体，名称为EA4-2，由重链和轻链组成，所述重链和所述轻链均由可变区和恒定区组成；所述重链和所述轻链的恒定区均来自于人；所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.1的第1-116位氨基酸所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2的第1-111位氨基酸所示。

上述抗体中，所述重链的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示。

上述抗体中，所述轻链的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示。

其中，SEQ ID No.1的第1-116位氨基酸为EA4-2的重链可变区序列，SEQ ID No.1的第117-446位氨基酸为EA4-2的重链恒定区序列。SEQ ID No.2的第1-111位氨基酸为EA4-2的轻链可变区序列，SEQ ID No.2的第112-218位氨基酸为EA4-2的轻链恒定区序列。

上述抗体中，所述重链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.3所示。

上述抗体中，所述轻链的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.4所示。

上述抗体中，本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本发明的所述重链或所述轻链的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，编码所述重链或所述轻链的核苷酸序列，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。

为解决上述技术问题，本发明还提供了与所述EA4-2相关的生物材料。

本发明所提供的与所述EA4-2相关的生物材料，为M或N：

M、下述E1)至E40)中的任一种：

E1)由编码所述重链的核酸分子和编码所述轻链的核酸分子组成的组合物；

E2)含有E1)所述组合物的表达盒；

E3)表达盒组合物，由E3a)的表达盒和E3b)的表达盒组成：

E3a)含有编码所述重链的核酸分子但不含有编码所述轻链的核酸分子的表达盒；

E3b)含有编码所述轻链的核酸分子但不含有编码所述重链的核酸分子的表达盒；