[发明专利]一种尖孢镰孢菌及其菌剂和应用在审
申请号: | 201510259384.3 | 申请日: | 2015-05-20 |
公开(公告)号: | CN104805022A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
发明(设计)人: | 孔令晓;纪莉景;王亚娇;栗秋生;王连生 | 申请(专利权)人: | 河北省农林科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/04;A01P13/02;C12R1/77 |
代理公司: | 北京修典盛世知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11424 | 代理人: | 胡长远 |
地址: | 071000 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 尖孢镰孢菌 及其 应用 | ||
1.一种尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)菌株Br-2,己于2015年1月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.10324。
2.利用权利要求1所述的尖孢镰孢菌生产的微生物菌剂,其特征在于所述的微生物菌剂含有尖孢镰孢菌Br-2菌体和发酵液。
3.按照权利要求2所述的微生物菌剂,其特征在于所述的微生物菌剂为固体制剂,所述的固体制剂中的尖孢镰孢菌Br-2的活菌数大于1×108cfu/g。
4.权利要求3所述的微生物菌剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)、将低温保存的Br-2菌株接种在PDA平板培养基上,在25℃活化培养72h,在菌落边缘用直径5mm的打孔器打出菌片,得Br-2菌片;
(2)、将步骤(1)活化的Br-2菌片接种于PDB液体培养基中,每200ml PDB液体培养基接种Br-2菌片4~5片;在25~26℃、转速170/rpm下振荡培养48~72h,得Br-2种子液;
(3)、向发酵罐加入发酵培养基,初始pH值用HCl调为5,灭菌后待温度降到25℃以下时采用负压方法按照重量百分比为0.5~1%的比例接入步骤(2)所得的Br-2种子液,在温度为25~30℃、通气量为1:0.3~1.0、搅拌速度为160~200rpm条件下发酵培养48~96h;其中所述的发酵培养基的组成成份及其重量百分比为:蔗糖2~4%,硫酸铵0.3~0.5%,磷酸氢二钾0.08~0.15%,硫酸镁0.03~0.06%,氯化钾0.08~0.15%和硫酸亚铁0.001~0.01%,其余为水;
(4)发酵培养48小时后,检测发酵液中分生孢子数量,待发酵液中分生孢子数量达到108即可停止发酵培养;离心浓缩10倍,所得即为Br-2菌株的液体制剂;
(5)按照1:1的重量比向步骤(4)所得的Br-2菌株的液体制剂中加入助剂,混匀干燥后即为Br-2菌株的固体制剂。
5.按照权利要求4所述的制备方法,其特征在于其步骤(3)中所述的通气量为0~24h 1:0.3;24~48h 1:0.6;48~96h 1:1。
6.按照权利要求4所述的制备方法,其特征在于其步骤(3)中所述的搅拌速度为160~170rpm。
7.按照权利要求4所述的制备方法,其特征在于其步骤(3)中所述的发酵培养时间为48~60h。
8.按照权利要求4所述的制备方法,其特征在于其步骤(5)中所述的助剂为硅藻土或麦麸。
9.权利要求1所述的尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)菌株Br-2在防治分枝列当(Orobanche acgyptiaca Pers.)或弯管列当(Orobanche cernua Loefling)上的应用。
10.权利要求2所述的微生物菌剂在防治分枝列当(Orobanche acgyptiaca Pers.)或弯管列当(Orobanche cernua Loefling)上的应用。
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