[发明专利]幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测试剂盒有效
申请号: | 201510263242.4 | 申请日: | 2015-05-21 |
公开(公告)号: | CN104846097B | 公开(公告)日: | 2017-12-22 |
发明(设计)人: | 裘惠良;郑银娜;邹耀东;田洁 | 申请(专利权)人: | 杭州千基生物科技有限公司;杭州美联医学检验所有限公司;杭州美联生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 深圳市博锐专利事务所44275 | 代理人: | 张明 |
地址: | 311215 浙江省杭州市萧山经济技*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 幽门 螺旋 杆菌 耐药 突变 基因 检测 试剂盒 | ||
1.一种用于幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:用于幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测的核酸膜条和PCR反应液;所述PCR反应液包括:PCR反应液Ⅰ、PCR反应液Ⅱ、PCR反应液Ⅲ和PCR反应液Ⅳ;
所述PCR反应液Ⅰ包括分型扩增引物:
引物VacAS-F2:SEQ ID NO:1;
引物VacAS-R2:SEQ ID NO:2;
引物VacAM-F2:SEQ ID NO:3;
引物VacAM-R2:SEQ ID NO:4;
所述PCR反应液Ⅱ包括分型扩增引物:
引物UreA-F2:SEQ ID NO:5;
引物UreA-R2:SEQ ID NO:6;
引物CagA-F2:SEQ ID NO:7;
引物CagA-R2:SEQ ID NO:8;
所述PCR反应液Ⅲ包括耐药突变扩增引物:
引物16S-F2:SEQ ID NO:9;
引物16S-R2:SEQ ID NO:10;
引物rdxA-F2:SEQ ID NO:11;
引物rdxA-R2:SEQ ID NO:12;
引物PBP1-F2:SEQ ID NO:13;
引物PBP1-R2:SEQ ID NO:14;
所述PCR反应液Ⅳ包括耐药突变扩增引物:
引物23S-F2:SEQ ID NO:15;
引物23S-R2:SEQ ID NO:16;
引物gyra-F2:SEQ ID NO:17;
引物gyra-R2:SEQ ID NO:18;
所述PCR反应液Ⅰ、PCR反应液Ⅱ、PCR反应液Ⅲ和PCR反应液Ⅳ还分别含有内控引物1对:
引物β-globin-F2:SEQ ID NO:19;
引物β-globin-R2:SEQ ID NO:20;
所述核酸膜条包括用于幽门螺旋杆菌分型检测的分型膜条和用于幽门螺旋杆菌耐药检测的耐药膜条,所述分型膜条包括用于幽门螺旋杆菌分型检测的核酸探针,其碱基序列如:SEQ ID NO:21-26;所述耐药膜条包括用于幽门螺旋杆菌耐药突变检测的核酸探针,其碱基序列如:SEQ ID NO:27-49。
2.根据权利要求1所述的用于幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测的试剂盒,其特征在于,
所述分型膜条包括基底和固定于所述基底上的核酸探针,所述核酸探针包括:
所述用于幽门螺旋杆菌分型检测的核酸探针;以及内参照核酸探针,其碱基序列如:SEQ ID NO:50;
所述耐药膜条包括基底和固定于所述基底上的核酸探针,所述核酸探针包括:
所述用于幽门螺旋杆菌耐药突变检测的核酸探针;以及内参照核酸探针,其碱基序列如:SEQ ID NO:50。
3.根据权利要求2所述的用于幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测的试剂盒,其特征在于,所述基底为尼龙膜。
4.根据权利要求1所述的用于幽门螺旋杆菌分型与耐药突变基因检测的试剂盒,其特征在于,所述引物5’端标记生物素,所述探针3’端标记氨基。
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