[发明专利]一种从黑蔓雷公藤中提取里格酚B的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种制备里格酚B的方法。

背景技术

里格酚B（Regeol B），分子式为C₂₉H₄₄O₅，分子量为472.67，结构式为：

里格酚B主要存在于卫予科(Celastraceae) 黑蔓雷公藤Tripterygium wilfordii var.regelii Makino茎中。药理学研究表明，里格酚B具有较强的抗促瘤活性，抑制TPA诱导的EBV-EA活化作用。

超声波具有“空化现象”、“机械振动”以及“热效应”等特性，“空化现象”可产生瞬间几千个压力，使提取介质中的微小气泡压缩、爆裂，破碎被提取原料和细胞壁，加速天然药用成份的溶出，“机械振动”和“热效应”进一步强化了溶出成份的扩散，使药用成份在提取介质中快速达到浓度平衡，可大大缩短提取成本，提高产品质量，是当前浸出提取中最具前途的提取技术。经文献检索，发现目前对里格酚B的研究较少，因此提供一种从黑蔓雷公藤中提取里格酚B的方法对含有里格酚B的黑蔓雷公藤的茎资源开发及药理研究具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种效率高、能耗低、制备量大、纯度高，适合工业化生产的制备里格酚B的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种从黑蔓雷公藤中提取里格酚B的方法，其特征在于包括以下步骤：

将干燥的黑蔓雷公藤的茎粉碎成大小均匀的粉末，过20~60目筛，将所得粗粉常温条件下加入料液比为1：3~5乙醇循环超声破壁萃取，萃取出带有残渣的里格酚B溶液，将其过滤，弃去滤渣，滤液减压浓缩至无醇味，浓缩液上聚酰胺层析柱，先用2~4倍柱体积蒸馏水洗脱，再用柱体积2~5倍、50~80%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，薄层检识，合并含有里格酚B的流分，流分用乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂萃取，收集萃取液，回收溶剂，得里格酚B精品。

所述乙醇浓度为70-90%。

所述循环超声破壁萃取时间为10~30min。

所述流分与乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂的体积比为1：0.5~1，乙酸乙酯和正丁醇的比例为1：1。

本发明的优点在于：1、采用的循环超声萃取技术具有效率高，能耗低，提取产品质量高，目标提取物提取率高，能耗低，适用范围广，自动化程度高、操作简便，产品性能价格比高等；2、采用聚酰胺层析柱和萃取技术相结合的方法来纯化里格酚B，可以大大提高所得产品的纯度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将干燥的黑蔓雷公藤的茎粉碎成大小均匀的粉末，过20目筛，将所得粗粉常温条件下加入料液比为1：3、70%乙醇循环超声破壁萃取10min，萃取出带有残渣的里格酚B溶液，将其过滤，弃去滤渣，滤液减压浓缩至无醇味，浓缩液上聚酰胺层析柱，先用2倍柱体积蒸馏水洗脱，再用柱体积2倍、50%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，薄层检识，合并含有里格酚B的流分，流分用乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂萃取（流分与乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂的体积比为1：0.5~1，乙酸乙酯和正丁醇的比例为1：1），收集萃取液，回收溶剂，得里格酚B精品。经检测，所得里格酚B含量为94.7%。

实施例2：

将干燥的黑蔓雷公藤的茎粉碎成大小均匀的粉末，过40目筛，将所得粗粉常温条件下加入料液比为1：4、80%乙醇循环超声破壁萃取20min，萃取出带有残渣的里格酚B溶液，将其过滤，弃去滤渣，滤液减压浓缩至无醇味，浓缩液上聚酰胺层析柱，先用3倍柱体积蒸馏水洗脱，再用柱体积4倍、70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，薄层检识，合并含有里格酚B的流分，流分用乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂萃取（流分与乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂的体积比为1：1，乙酸乙酯和正丁醇的比例为1：1），收集萃取液，回收溶剂，得里格酚B精品。经检测，所得产品中里格酚B含量为95.2%。

实施例3：

将干燥的黑蔓雷公藤的茎粉碎成大小均匀的粉末，过60目筛，将所得粗粉常温条件下加入料液比为1：5、90%乙醇循环超声破壁萃取30min，萃取出带有残渣的里格酚B溶液，将其过滤，弃去滤渣，滤液减压浓缩至无醇味，浓缩液上聚酰胺层析柱，先用4倍柱体积蒸馏水洗脱，再用柱体积5倍、80%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，薄层检识，合并含有里格酚B的流分，流分用乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂萃取（流分与乙酸乙酯和正丁醇的混合溶剂的体积比为1：0.5~1，乙酸乙酯和正丁醇的比例为1：1），收集萃取液，回收溶剂，得里格酚B精品。经检测，所得产品中里格酚B的含量为96.2%。