[发明专利]一种山香酸A的制备方法及抗肿瘤应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种植物提取物的制备方法及应用，特别涉及一种山香酸A的制备方法及抗肿瘤应用。

背景技术

山香酸A（Hyptatic acid A），无色棱晶，mp.298-304℃，分子式为C₃₀H₄₈O₅，分子量为488.71。

山香酸A是从唇形科(Labiatae) 头状山香 Hyptis capitata Jacq.地上部分中分离得到一种三萜类化合物。药理研究表明，山香酸A具有细胞毒活性，对A-549、HCT-8、P388呈细胞毒活性。其ED50(μg/ml)依次为5.9、4.2、6.7。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，，提供一种山香酸A的制备方法及抗肿瘤应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种山香酸A的制备方法，其特征在于包括以下步骤：取头状山香地上部分原料粉碎，加入5-10倍量50%-99%甲醇溶液，超声提取2-3次，提取液缩后加入大孔树脂柱中吸附，先用3-9倍量10%-50%甲醇溶液洗脱，再用5-10倍60%-90%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph3-5，加入乙酸乙酯充分搅拌，收集乙酸乙酯层，浓缩所得固体用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压干燥即得。

所述的大孔树脂可选HZ816、HPD100、AB-8和D101中的一种。

所述的高速逆流色谱仪分离条件为：取石氯仿、甲醇、水，按3-7:2-5:1-3混合，取上相做固定相、下相为流动相，主机转速700-1000rpm，流速为1-3ml/min。

所述制备的山香酸A，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

采用本法制备山香酸A，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染；添加肠吸收促进剂，有利于提高生物利用度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

山香酸A的制备

取头状山香地上部分粉碎，称20kg，用8倍90%甲醇溶液超声提取30分钟，提取3次，提取液减压浓缩后加入HZ816大孔树脂柱中吸附，用5倍柱体积50%甲醇溶液洗脱，再用8倍柱体积85%甲醇溶液洗脱，洗脱液浓缩调节ph4，加入乙酸乙酯充分搅拌，收集乙酸乙酯层，得固体粗提物。取氯仿、甲醇、水，按3:2:1混合，充分分层后，取上相注满高速逆流色谱管做固定相，开转主机，转速800rpm，同时泵入下相做流定相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，用流动相溶解浸膏，由进样阀进样，蒸发光散射检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，流分回收试剂，得山香酸A1.2g，经HPLC检测，含量99.5%。

实施例2：

山香酸A的抗肿瘤应用

1、材料

动物：昆明种小鼠，雌雄各半性，体重20±2g，由南京中医药大学提供。

细胞株：Sarcoma 180腹水型瘤株（S180），由中国科学院上海药物研究所提供。

2、方法

取50只小鼠，每只小鼠左腋下接种S₁₈₀瘤液，次日随机分成5组，每组10只，分别为生理盐水对照组（NS组）、阳性对照组、山香酸A低剂量组（1mg/kg）、中剂量组（2mg/kg）、高剂量组（4mg/kg）。接种24h后山香酸A给药组灌胃给药，连续7，阳性对照组试验期间腹腔注射2次，隔日给药。期间，每日观察小鼠的一般活动、皮毛、粪便等情况。最后一次给药24h后断颈处死，称重，并计算抑瘤率。

3、结果

本发明植物提取组合物对小鼠S₁₈₀皮下荷瘤有明显的抑制作用，抑瘤率为68.32-74.26%，结果见表1。

抑瘤率（%）=（1-治疗组平均瘤重/空白对照组平均瘤重）×%