[发明专利]一种纤维素酶生产菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物化学领域，具体涉及一种纤维素酶生产菌及其应用。

背景技术

纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的多组分酶的总称，在饲料、酒精、纺织和食品等领域具有巨大的市场潜力，纤维索酶的来源非常广泛，昆虫、软体动物、原生动物、细菌、放线菌和真菌等都能产生纤维素酶。长久以来，人们对真菌产酸性纤维索酶研究得最为深入和广泛，但随着纤维素酶应用领域范围的扩大，传统的真菌产酸性纤维素酶并不能够适用于所有行业，而细菌产的中性、碱性纤维素酶却在纺织、洗涤剂、造纸，处理环境污染等行业日益显现出它特有的优势。但是目前国内对于中性、碱性纤维素酶的报道仍很少，大多是由于细菌产生的纤维素酶活力不高所致，筛选出一株高产中性纤维素酶产生苗及确定其培养方法显得至关重要。

就动物饲料而言，真菌生产的酸性纤维素在上世纪80年代早期就被添加到奶牛，肉鸡，家猪等畜禽类饲料中，并能显著的提高饲料的利用率及增加畜禽的免疫力。但是酸性纤维素并不适合水产动物饲料添加及水生环境污染的处理。水产动物和畜禽差别很大，饲料酶制剂在水产饲料中的应用与畜禽酶制剂的应用有很大的差别。水产动物适宜的生长温度一般较畜禽低，为15-32℃；鱼类的消化道pH值与畜禽也不一样，很多鱼没有胃，肠道的pH值为6.8-7.3，基本为中性，而畜禽的消化道pH多为酸性；养殖水体一般都处于中性环境。目前，在现代的水产集约化养殖中广泛存在大量纤维素成分降解不完全的问题，这些问题一方面造成了动物饲养成本居高不下，另一方面带来大量的环境污染，因此一种适合水生中性环境的高效表达中性纤维素酶的菌种和体系对水产行业拥有巨大的潜在意义。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术存在的不足，本发明所要解决的第一个技术问题是提供了一种纤维素酶生产菌。

本发明所要解决的第二个技术问题是提供了一种纤维素酶。

本发明所要解决的第三个技术问题是提供了一种纤维素酶的生产方法。

本发明所要解决的第四个技术问题是提供了上述纤维素酶在制备水产饲料方面的应用。

技术方案：为解决上述技术问题，本发明提供了一种纤维素酶生产菌，其特征在于，其分类命名为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)，该菌株已于2015年5月21号保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015320，保藏地址：湖北省武汉市武昌区武汉大学保藏中心(武汉大学第一附属小学对面)。该巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)CCTCC M 2015320的简称命名为SMY0001。

该巨大芽孢杆菌系发明人从草鱼肠道中分离筛选得到的。该菌株具有如下特性：SMY0001菌株既可以在酵母膏、LB合成培养基上生长，其主要代谢产物为纤维素酶。生长pH值范围为5.5-10.0，生长温度范围为25-42℃。SMY0001菌体细胞杆状，末端方，成短或长链。产芽孢，芽孢椭圆形或柱形，中生或近中生。好氧型，革兰氏阳性。SMY0001在细菌培养基平板(牛肉膏59，蛋白胨109，氯化钠59，琼脂209，蒸馏水1000ml，调pH7.8-8.2)上的菌落特征是：形态为圆形，表面粗糙不透明，污白色或微黄色，该菌株鉴定为该巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。

一种纤维素酶，所述纤维素酶来源于所述的纤维素酶生产菌。

一种纤维素酶的生产方法，通过以所述的纤维素酶生产菌经过诱导培养基振荡培养高效表达而得到纤维素酶。

其中，上述诱导培养基按照质量百分比计算，包括以下组分:羧甲基纤维素钠1％、尿素1％,无机盐1.5％,水96.5％。

其中，上述振荡培养的温度为28℃，培养时间4天，振荡培养的装置转速为120-200r/min。

其中，上述无机盐为氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、氯化钙、硫酸酶中的一种或一种以上。

上述的纤维素酶在制备水产饲料方面的应用。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点如下：

1)本发明提出的方法得到的是在pH中性下适用的纤维素酶，而国内现在一般生产的都是酸性条件下适用的纤维素酶，中性及碱性纤维素酶在水产养殖应用方面明显优于酸性纤维素酶；

2)使用的菌种为巨大芽孢杆菌，和目前国内一般采用木霉菌作为纤维素酶生产菌种不同。该方法所使用的巨大芽孢杆菌是一种易于保存、扩增、繁殖快、适合大规模生产的菌种，可以缩短生产周期；

3)该方法所制备的纤维素酶活力高、对pH适用范围广稳定性好；