[发明专利]贝母素甲用于制备免疫抑制剂的应用

说明书

本发明涉及贝母素甲的新用途，尤其涉及贝母素甲用于制备免疫抑制剂的应用。本发明经过贝母素甲对Kv1.2‑‑Kv1.8离子通道抑制作用的试验，发现贝母素甲能与Kv1.3通道有较强选择性结合，从而降低过度兴奋的T淋巴细胞，减弱对于T淋巴细胞的活化，从而降低T细胞活性，最终降低细胞免疫，而对其它钾离子通道作用很弱。由于贝母素甲是选择性通过抑制Kv1.3离子通道，可以降低如硬皮病，红斑狼疮等免疫系统功能亢进疾病治疗所引起的不良反应而不影响正常的免疫功能，因此这一类新药的开发具有重大意义。

技术领域

本发明涉及贝母素甲的新用途，尤其涉及贝母素甲用于制备新型免疫抑制剂的应用。

背景技术

T淋巴细胞亚型参与免疫应答的各个阶段，在免疫调节中发挥关键作用，当免疫调控紊乱以及免疫平衡调节机制破坏时将会导致自身免疫疾病的发生。自身免疫性疾病主要包括硬皮病、系统性红斑狼疮、血清病、类风湿性关节炎等，其发生的原因是由于对自己或非己识别的控制机制出现了问题，使得一些自身反应性T细胞能够逃避克隆清除，识别自身的外周组织抗原并且引起自身免疫反应。通过调节T淋巴细胞膜离子通道功能来改变T细胞的活性，可达到治疗自身免疫疾病的目的。目前，传统治疗自身免疫疾病的方法均以免疫抑制为主，主要以遏制自身反应性淋巴细胞的增殖为目的，非特异性免疫抑制剂的应用以及特异地应用免疫耐受T细胞的疫苗会对整个免疫系统进行抑制，其结果往往导致疫苗等毒性累积而出现严重副作用，同时会不同程度地影响机体正常免疫反应而降低机体对感染和肿瘤等免疫作用。

钾通道在T淋巴细胞的活化中起重要作用，T淋巴细胞活化的关键磷酸酶是钙依赖的神经钙蛋白磷酸酶，其中与T淋巴细胞关系最为密切的钾离子通道是：电压门控钾通道Kv1.3 和钙激活依赖的钾通道KCa 3.1(也称IKCal，KCNN 4，hKCa 4)。因此能选择性抑制电压门控钾通道Kv1.3或钙激活依赖的钾通道KCa 3.1，都会影响T淋巴细胞的功能。

Kv1.3钾离子通道是人类T淋巴细胞上表达最丰富、生理功能最重要的一类电压依赖型钾离子通道(PANYI G，2005；JASON R et al，2010)，在T淋巴细胞的活化、增殖、分化以及免疫功能调节中具有重要的作用，其表达数量与T细胞亚型、细胞分化状态和细胞活化状态有关。Kv1.3和IK_Cal共同为持续的钙内流提供必需的阳离子流出平衡，T细胞活化需要通过钙释放的钙通道从外部环境持续输入钙离子，钙离子内流使膜去极化。Kv1.3的开放适应膜的去极化和维持膜的静息电位，而IK_Cal开放则增加胞质钙和使膜电位超极化。Kv1.3是人类静息T细胞钙信号的基本调节器。

钾通道在T淋巴细胞的活化中起重要作用，开放通道增加跨膜电位负值，这就反过来通过钙释放活化的钙通道增加钙内流，进一步导致钙依赖的神经钙蛋白磷酸酶活化，后者是T 淋巴细胞活化的关键磷酸酶。增加表达的钾通道能明显使活化的T淋巴细胞超极化，加速的钙内流保证了高水平的胞内钙离子，后者是T淋巴细胞充分活化和产生细胞因子所必须的。相应的，钾通道阻滞剂使T淋巴细胞保持负性膜电位和长效钙信号的能力降低。CD8+细胞分为三个主要的亚群，分别是幼稚细胞、中心记忆细胞和效应记忆细胞。静息的人类T淋巴细胞表达Kv1.3约300～400个/细胞，IK_Cal约8～10个/细胞，阻滞静息T细胞上的Kv1.3能使膜电位从-50mV升到-30mV。静息状态，幼稚的中心记忆细胞(TCM)和表达CD4及CD8的TCM 都表达过多的Kv 1.3(约200～300个/细胞)，而IK_Cal仅仅表达8～20个/细胞。幼稚的效应细胞和TCM在抗原或丝裂原刺激后表达相似数量的两种通道((Kv1.3约400～500个/细胞，IK_Cal约200～500个/细胞)。而抗原或丝裂原刺激的CD 4+和CD 8+TEM，Kv1.3表达增加至1500 个/细胞，远多于K_Cal的表达(约10个/细胞)。在人类的T淋巴细胞中，IK_Cal和Kv1.3在T淋巴细胞的分化以及抗原介导的免疫反应如细胞因子白细胞介素(IL)-2，肿瘤坏死因子(TNF) -A，干扰素(IFN)-C中起调节作用。