[发明专利]一种美登叶酸的提纯方法在审

专利信息
申请号: 201510270134.X 申请日: 2015-05-26
公开(公告)号: CN104945462A 公开(公告)日: 2015-09-30
发明(设计)人: 刘东锋;杨成东 申请(专利权)人: 南京泽朗医药科技有限公司
主分类号: C07J63/00 分类号: C07J63/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 210046 江苏省南京市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 叶酸 提纯 方法
【权利要求书】:

1.一种美登叶酸的提纯方法,其特征在于以下步骤:

1)取干燥的卫矛原料粉碎,过20~60目筛,收集粗粉备用;

2)按0.1~0.5g纤维素酶/L水的比例将纤维素酶溶于蒸馏水中,搅拌均匀,滴加盐酸溶液,调节pH值4~5;

3)将卫矛粗粉加入上述纤维素酶的水溶液中,搅拌均匀,水浴加热到45~50℃,恒温酶解1~2h,而后升温至60~80℃,加热20~40min,进行灭酶,即得酶解混合物;

4)在上述酶解混合物中加入料液比为1:3~5、30%的乙醇水溶液进行超声提取,过滤,滤渣超声提取1~3次,合并滤液减压浓缩至无醇味,收集浓缩液备用;

5)将所得浓缩液上大孔吸附树脂柱,先用2~5倍柱体积的蒸馏水洗脱,再用10~20%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;

6)洗脱液采用高速逆流色谱纯化,根据图谱收集目标成分,回收试剂,冷冻干燥即得美登叶酸。

2.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤3)所述的卫矛粗粉加入与纤维素酶水溶液的质量体积比为1:1~5。

3.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤4)所述超声提取的频率为20~40KHz,温度为50~70℃。

4.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤5)中所述大孔吸附树脂为X-5、LSA-21、WLD中的一种。

5.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤6)所述的高速逆流色谱分离的溶剂体系为氯仿-甲醇-正丙醇-水溶剂系统,混合比例9-18:12-24:1-2:8-16,取下相做固定相,上相做流动相。

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