[发明专利]一种美登叶酸的提纯方法在审
申请号: | 201510270134.X | 申请日: | 2015-05-26 |
公开(公告)号: | CN104945462A | 公开(公告)日: | 2015-09-30 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京泽朗医药科技有限公司 |
主分类号: | C07J63/00 | 分类号: | C07J63/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 叶酸 提纯 方法 | ||
1.一种美登叶酸的提纯方法,其特征在于以下步骤:
1)取干燥的卫矛原料粉碎,过20~60目筛,收集粗粉备用;
2)按0.1~0.5g纤维素酶/L水的比例将纤维素酶溶于蒸馏水中,搅拌均匀,滴加盐酸溶液,调节pH值4~5;
3)将卫矛粗粉加入上述纤维素酶的水溶液中,搅拌均匀,水浴加热到45~50℃,恒温酶解1~2h,而后升温至60~80℃,加热20~40min,进行灭酶,即得酶解混合物;
4)在上述酶解混合物中加入料液比为1:3~5、30%的乙醇水溶液进行超声提取,过滤,滤渣超声提取1~3次,合并滤液减压浓缩至无醇味,收集浓缩液备用;
5)将所得浓缩液上大孔吸附树脂柱,先用2~5倍柱体积的蒸馏水洗脱,再用10~20%的乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液;
6)洗脱液采用高速逆流色谱纯化,根据图谱收集目标成分,回收试剂,冷冻干燥即得美登叶酸。
2.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤3)所述的卫矛粗粉加入与纤维素酶水溶液的质量体积比为1:1~5。
3.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤4)所述超声提取的频率为20~40KHz,温度为50~70℃。
4.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤5)中所述大孔吸附树脂为X-5、LSA-21、WLD中的一种。
5.根据权利要求1所述美登叶酸的提纯方法,其特征在于步骤6)所述的高速逆流色谱分离的溶剂体系为氯仿-甲醇-正丙醇-水溶剂系统,混合比例9-18:12-24:1-2:8-16,取下相做固定相,上相做流动相。
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