[发明专利]蜜环菌菌剂的制备方法及该方法制成的蜜环菌菌剂

说明书

本发明涉及真菌菌剂制备领域，具体而言，涉及一种蜜环菌菌剂的制备方法及该方法制成的蜜环菌菌剂。蜜环菌菌剂的制备方法，包括将蜜环菌原菌的菌索段接入菌株保藏培养基中培养后常温放置，得到待活化菌种；将待活化菌种的尖端菌索转接至菌种活化培养基中进行活化；将活化后菌种扩繁；将扩繁后的固体菌种进行两次暗培养，得到二级液体菌种，并进行深层发酵培养。本发明提供的该方法可获得用于直接侵染枝条的蜜环菌菌剂，该菌剂接种到枝条后约30天即可用于人工种植猪苓或天麻，与现有技术相比，缩短了菌材的获取时间(不经过原种阶段)，进而使得蜜环菌菌材的产量得到保障，还可为医药业获取其药用成分提供充足的物质来源。

技术领域

本发明涉及真菌菌剂制备领域，具体而言，涉及一种蜜环菌菌剂的制备方法及该方法制成的蜜环菌菌剂。

背景技术

蜜环菌Armillaria mellea(vahl.ex Fr.)Quel是一种药(食)用菌，隶属于担子菌亚门(Basidomycotina)，层菌纲(Hymenomycetes)，伞菌目(Agaricales)，口蘑科(Tricholomataceae)，又名糖蕈、蜜色环菌、蜜蘑、栎菌、小蜜环菌、蜜环蕈、青冈菌；该菌是仅有的几个具有菌索的种类之一，在东北地区俗称“榛蘑”。当前，蜜环菌人工栽培产量有限。

在相关技术中，蜜环菌菌索生长缓慢、形成菌球时间长、出菇条件苛刻，进而使得蜜环菌菌材的产量不能得到保障。随着蜜环菌菌材在作为药材(或食材)方面的需求不断增大，因此，提供一种能够直接侵染枝条(以实现蜜环菌菌材制备)的蜜环菌菌剂是生产中亟待解决的一个技术问题。

发明内容

本发明的目的在于一种蜜环菌菌剂的制备方法，以解决上述的技术问题。

在本发明的实施例中提供了一种蜜环菌菌剂的制备方法，包括以下步骤：

1)、将蜜环菌原菌的菌索段接入菌株保藏培养基中进行培养，待所述菌索段的尖端长至所述菌株保藏培养基深度的1/2时，置于22-25℃的温度下放置3天，得到待活化菌种；

其中，按照重量份数计，所述菌株保藏培养基的原料组份包括：玉米粉提取液38-42份、蔗糖18-22份、麸皮28-32份、琼脂8-12份、硫酸镁0.5份、磷酸二氢钾0.5-1.5份；

2)、将所述待活化菌种的尖端菌索转接至菌种活化培养基中进行活化，得到活化后菌种；

其中，按照重量份数计，所述菌种活化培养基的原料组份包括：麦粒提取液38-42份、琼脂8-12份、葡萄糖18-22份、磷酸二氢钾1-2份、硫酸镁2-4份；

3)、将所述活化后菌种接种到另一新的所述菌种活化培养基中进行扩繁，得到扩繁后的固体菌种；

4)、利用麸皮液体培养基将所述扩繁后的固体菌种进行两次暗培养，得到二级液体菌种；

其中，按照重量份数计，所述麸皮液体培养基包括：麸皮提取液48-52份、葡萄糖18-22份、磷酸二氢钾1-2份、硫酸镁0.75份、维生素0.01份；

5)、将所述二级液体菌种接入所述麸皮液体培养基中进行深层发酵培养，得到能够直接侵染枝条的蜜环菌菌剂。

本发明提供的这种蜜环菌菌剂的制备方法，通过探索蜜环菌的生长条件，依次将其原菌的菌索段(一般来源于与其伴生的猪苓或天麻专用菌株)接种到菌株保藏培养基中，该培养基含有大量的玉米粉提取液以及碳源等，可供菌株的营养所需。接种后，菌索段的尖端会向着培养基的内部生长，待其伸入到培养基后，置于0-4℃的温度下保藏(半年内蜜环菌的种性不会发生明显变化)，使其处于半休眠状态，以后使用时进行活化。