[发明专利]有序释放生长因子与抗生素的复合微球及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种有序释放生长因子与抗生素的复合微球及其制备方法和应用。

背景技术

软、硬组织病缺损通常伴随感染，要实现组织病缺损的再生修复，首先要消除炎症。因此，在临床上迫切需要发明一种可实现生长因子与抗生素有序释放的药物载体，快速抑制炎症的同时持续诱导病缺损组织的修复。目前，高分子载药微球受到人们的广泛关注，因为其具有缓释药物和定向给药的作用，可提高药物的生物利用度；此外，微球可通过皮下埋植、注射和关节给药使用。

聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）是由乳酸和羟基乙酸人工合成的高分子聚合物，它具有良好的生物相容性和可控的生物降解性，它们的降解产物能够参与人体的新陈代谢。目前，PLGA已被美国食品管理局(FDA)批准用于人体。因此，PLGA微球作为缓释给药输送系统，具有十分广泛的应用前景，但也存在一些缺点，如药物缓释初期会出现大量突释、微球降解产物产生酸性环境等，限制了PLGA微球的实际应用。如何克服PLGA微球的大量突释、并实现生长因子与抗生素的有序释放，达到快速消炎与持续诱导病缺损组织修复的目的，是本技术领域的一个重要研究方向。

目前，通常采用改进制备条件改善突释问题，如在微球表面包裹隔离层，加快溶剂挥发等方法。乙二醇壳聚糖（GC）是壳聚糖的衍生物，不仅具有壳聚糖良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性等优点，而且它克服了壳聚糖只能在酸性条件下溶解的不足，在任何pH值条件下均能溶解，制备条件更温和。利用GC修饰PLGA微球可增加微球的细胞粘附性、减少突释。

因此，本发明结合PLGA与GC的优点，制备GC修饰共载生长因子与抗生素的PLGA微球，有望实现快速消炎与持续诱导病缺损组织修复的目的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有序释放生长因子与抗生素的复合微球，该微球可改善生长因子突释现象，并实现抗生素与生长因子的有序释放，快速抑制炎症的同时持续诱导病缺损组织修复，且其制备过程简单、价廉易得。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种有序释放生长因子与抗生素的复合微球是由GC修饰共载生长因子与抗生素的PLGA微球，其中抗生素包载于GC外壳，生长因子包载在PLGA内核；微球具有有序释放功能，外壳的抗生素释放较快，可实现快速消炎作用，内核的生长因子缓慢释放，诱导组织再生。

制备方法包括如下步骤：

1）将1~50 μg/mL的生长因子水溶液缓慢滴加至20~120 mg/mL 的PLGA溶液，采用高速匀质机在6000~20000 r/min乳化1~5 min得到初乳W1/O；

2）将GC与抗生素溶解于聚乙烯醇(PVA)水溶液，得到GC/抗生素/PVA溶液；

3）将步骤1）得到的初乳W1/O缓慢滴加到步骤2）得到的GC/抗生素/PVA溶液中， 采用匀质机在800~12000 r/min搅拌2~15 min得到复乳W1/O/W2；

4）将复乳搅拌4~48 h，去离子水离心洗涤，冷冻干燥，得到共载生长因子与抗生素的复合微球。

所述PLGA的粘度为0.4-2.0 dL/g；PLGA中乳酸与乙醇酸的摩尔百分比为50:50~85:15；GC的相对分子质量为5~100 KDa。

所述的PVA与去离子水的质量体积比为0.5~2%；GC与PVA水溶液的质量体积比为0.2~2%；所述的抗生素与PVA水溶液的质量体积比为0.1~10%。

所述PLGA溶液中的溶剂可为二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙腈中的任意一种。

所述的生长因子可为碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子（TGF-β）、表皮生长因子(EGF)、骨形态发生蛋白(BMP)、胰岛素样生长因子（IGF-1、IGF-2）、血小板衍生生长因子（PDGF）、血管内皮生长因子（VEGF）中的一种。

所述的抗生素为β-内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类、四环素类、氯霉素类、作用于G+/G-细菌的其他抗生素中的任一种水溶性抗生素。