[发明专利]三种高山鼠尾草属植物中丹参酮类组分的前处理方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学及生物医药技术领域，尤其涉及三种高山鼠尾草属植物中丹参酮类组分的前处理方法。

背景技术

鼠尾草属（Salvia L.）是唇形科最大属，青藏高原上主要分布三种鼠尾草种，粘毛鼠尾草（Salvia roborowskii）、甘西鼠尾草（Salvia przewalskii Maxim.）及康定鼠尾草（Salvia prattii）。现代研究表明鼠尾草属植物中的化学成分与丹参较为接近，其中具有较好生物活性的特征性成分（二萜醌类化合物）。目前，从鼠尾草属植物中分离鉴定出的化学成分主要包括酚酸类及二萜醌类，其中丹参酮类化合物可用来增加冠状血管流量，用于治疗冠心病、心肌梗塞等。

目前，已报道从鼠尾草属植物中分离出二萜醌类化合物包括丹参酮I、丹参酮II_A、丹参酮II_B、隐丹参酮、去甲丹参酮、羟基丹参酮、二氢丹参酮、丹参醛、丹参酸甲酯、紫丹参甲素、紫丹参乙素、丹参新醌甲、丹参新醌乙、甘西鼠尾新酮、1,2-二氢丹参新醌、丹参内酯等（陈万生，贾鑫明，张卫东，等. 甘西鼠尾草根化学成分研究. 药学学报，2003, 38(5): 354~357）；从粘毛鼠尾草全草中分离得到丹参酮I、丹参酮II_A、隐丹参酮、亚甲基丹参醌等（国家中药管理局《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 第七册. 上海：上海科学技术出版社, 1999:190），研究报道主要集中于对甘西鼠尾草及粘毛鼠尾草通过柱色谱、结晶等复杂手段对其化学成分进行研究，而有关三种高山鼠尾草属植物中丹参酮类组分前处理方法的研究未见文献报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、易规模化实施、重复性较好、质量稳定可控的三种高山鼠尾草属植物中丹参酮类组分的前处理方法。

为解决上述问题，本发明所述的三种高山鼠尾草属植物中丹参酮类组分的前处理方法，包括以下步骤：

⑴提取：将粘毛鼠尾草、甘西鼠尾草或康定鼠尾草中的一种全草阴干、粉碎，得到粉碎后的鼠尾草植物，该粉碎后的鼠尾草植物中按1kg：4~8L的料液比加入体积分数为70%~95%的乙醇溶液或体积分数为80%~100%的甲醇溶液，在60℃~95℃提取1~3次后过滤，每次1~3 h，合并得到滤液；所述滤液经减压干燥至膏状，即得深红色提取物；

⑵树脂柱色谱富集：所述深红色提取物中加入其质量的10~20倍的体积分数为30~50%的甲醇溶液溶解，并经树脂柱进行分离后，分别以水溶液、体积分数为50%的甲醇溶液、体积分数为70%~80%的甲醇溶液按2~5倍的柱体积进行梯度洗脱，收集70%~80%甲醇洗脱物；所述70%~80%甲醇洗脱物经减压干燥即得丹参酮类组分粗品；

⑶硅胶柱色谱除杂：

所述丹参酮类组分粗品经硅胶柱色谱分离后，用氯仿-甲醇-水的混合溶剂按3~5倍的柱体积进行洗脱，并按每份500 mL收集馏分，采用薄层色谱检测收集Rf值为0.7~0.9的馏分，该馏分经减压干燥后即得红色粉末状的丹参酮类组分。

所述步骤⑴、所述步骤⑵和所述步骤⑶中的减压干燥条件均是指真空度为0.06~0.09 MPa，温度为50~70 ℃。

所述步骤⑵中树脂柱是指HP20SS型树脂柱或MCI型树脂柱。

所述步骤⑶中的硅胶柱的尺寸为30 mm ~80 mm×60 mm~100 mm。

所述步骤⑶中的氯仿-甲醇-水的混合溶剂是指氯仿、甲醇及水按9：1：0.1~8：2：0.2的体积比混合而成。

所述步骤⑶中的薄层色谱检测的条件是指展开剂为氯仿、甲醇及水按9：1：0.1的体积比混合而成的混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明采用醇提，可直接将三种高山鼠尾草属植物中水溶性生物大分子成分保留在原料中；同时，溶剂可重复回收利用。

2、本发明采用树脂柱富集，可有效富集样品种丹参酮类化合物，工艺简单，易于实施；同时，树脂柱可以再生循环使用且树脂价格低廉。

3、本发明采用硅胶柱除杂，可直接将三种高山鼠尾草属植物中极性成分与丹参酮类成分分开，同时除去部分强极性杂质。

4、本发明原料要求不高，一般市场上或野生原材料即可，易于批量备料。