[发明专利]一种高纯度土霉素的生产工艺

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药工艺技术领域，具体是一种高纯度土霉素的生产工艺。

背景技术

土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（TerramycinOxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，也用于畜禽药及饲料添加剂。

土霉素是通过生物合成得到的广谱抗生素，目前国内土霉素提取工艺为用草酸（或磷酸）做酸化剂调节PH值，利用黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用122树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调PH至4．8左右结晶得到土霉素碱产品。此工艺在生产中一直沿用至今，不思创新。但该工艺所得的土霉素收率低，成品纯度亦不足，纯度仅有96％～97％。

发明内容

为了解决上述现有土霉素生产工艺的收率低，成品纯度不足的缺点，本发明在原有工艺的基础上加以调节、创新，提供了一种高纯度土霉素的生产工艺。

本发明的技术方案如下：一种高纯度土霉素的生产工艺，包括以下步骤：

（1）发酵：首先培养三支斜面孢子, 斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用纯净水配制，控制培养基内温度为36.5～36.8℃，相对湿度为50%～60%，培养时间设置为96～108小时；将制得的三支斜面孢子加入无菌水之后制成培养液，将培养液放置于4℃～6℃的冰箱中备用；

准备三个自带有搅拌装置和温度自动调节装置的发酵罐，分别命名为1号、2号、3号，使用前都采用蒸汽灭菌法灭菌；将上述冰箱中的培养液移入1号发酵罐内，设置罐内温度为30℃，密封1号发酵罐，发酵28～30小时后，将培养液移入2号发酵罐；

设置2号发酵罐罐内温度为31℃，密封2号发酵罐，发酵28～30小时后，用pH计测量培养液的pH值，若pH值大于6.0，将培养液移入3号发酵罐；否则继续培养；

设置3号发酵罐罐内温度为35℃，密封3号发酵罐，发酵80～100小时后，向罐内通入适量氧气，向培养液内通入15%质量分数的氨水，同时用pH计测量pH值，当pH值大于6.4后，停止通入氨水；之后每隔10小时重复通入氧气和氨水的操作；发酵150～160小时后，停止通入氧气和氨水，然后再发酵15个小时，取出培养液；

（2）酸化：向培养液中缓慢加入65%质量分数的盐酸作为酸化剂，添加过程中，用pH计监测培养液的pH值，当pH值稳定在1.6～1.9内，停止加入酸化剂；

（3）纯化：向培养液中搅拌加入纯化剂K2Fe（CN）6－ZnSO4，加入纯化剂的容积约等于培养液容积的一半，二者反应后，溶液中出现大量兰绿色絮状物；

（4）过滤：将上述产生沉淀的培养液经粗滤器、精滤器、超滤器三重过滤后，抽滤出净化滤液，用10%质量分数的稀盐酸调节pH值在4.8左右；

（5）脱色：将上述净化滤液通入脱色罐，由其中的122-2树脂进行脱色；

（6）结晶：取出上述脱色后的培养液，加入55%质量分数的氢氧化钠溶液，调节pH值为4.5～4.8，控制培养液温度在28～30℃；培养液经离心结晶设备连续结晶，控制结晶速度，使结晶时间控制住2～2.5小时，得到土霉素湿成品；

（7）干燥：将上述土霉素湿成品经过摇摆机过40目的筛网，制成颗粒后进入三级旋风干燥器中，干燥后得到土霉素成品。

所述3号发酵罐中的发酵过程会产生大量泡沫，需加入消沫剂进行消沫。

所述1号发酵罐内发酵完成后，培养液趋于浓厚，并转黄色，培养液的pH值在6.0～6.4内; 所述2号发酵罐内发酵完成后，培养液的外观为深粽色，浓稠状，有少量气泡产生。

所述发酵过程中的使用三个发酵罐若有条件限制，可以改为使用一个发酵罐，但对应设置三段相同发酵条件的发酵过程。

所述酸化过程中加入的酸化剂可以更改为65%质量分数的草酸或磷酸。

本发明的优点：本发明在原有工艺的基础上加以调整、创新，提供了一种高纯度土霉素的生产工艺。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。

一种高纯度土霉素的生产工艺，包括以下步骤：